克雷白氏肺炎桿菌中超廣效性乙內醯胺酶與第一類Integron之分析

Analysis of Extended-Spectrum β-Lactamases and Class 1 Integrons in Clinical Isolates of Klebsiella pneumoniae

沈怡君(Yi-Chun Shin)

指導教授 ： 張仲羽

高雄醫學大學/醫學院/醫學研究所/碩士(2008年)

摘要

超廣效性乙內醯胺酶 ( Extended-Spectrum β-lactamases；ESBLs )能高度水解乙內醯胺類抗微生物製劑，通常是藉由質體傳遞( plasmid-mediated )。在台灣，克雷白氏肺炎桿菌 ( Klebsiella pneumoniae；Kp ) 的ESBLs盛行率有逐年升高的趨勢，是不容忽視的問題。克雷白氏肺炎桿菌為常見的伺機性感染菌，普遍存在於社區與院內感染，會引起肺炎、尿道感染、腦膜炎及化膿性膿瘍症等臨床併發症。克雷白氏肺炎桿菌更是台灣原發型化膿性肝膿瘍的主要致病菌，因此克雷白氏肺炎桿菌為國內一個重要的感染菌。第一類integron ( class 1 ) 和抗藥基因片匣 ( gene cassettes ) 是細菌獲得抗藥性基因及抗藥基因在細菌間散佈的重要機制之一。本研究主要分析克雷白氏肺炎桿菌中ESBLs、class 1 integron及基因片匣，並探討plasmid-miediated ESBLs與integron間的相關性，以及其散佈情形的分析。
本研究之實驗菌株，收集自高雄醫學大學附設醫院臨床患者檢體分離的克雷白氏肺炎桿菌，1993年有228株、2004年有392株，共620株，並根據CLSI之規範進行藥敏試驗，另以combined disk-test及 boronic acid disk-test確認ESBLs之表現型，ESBL的基因型則利用聚合酶連鎖反應、限制酶切割與核酸定序，結果於620株臨床菌株中81株具有ESBLs，比例為13.1%，blaSHV與blaCTX-M 分別有76株 ( 76/81，93.8% ) 和11株 ( 11/81，13.6% )。其中又以blaSHV-12 這種基因型最多 ( 35/81，43.2% )，而blaCTX-M-1 group與blaCTX-M-9 group分別為8株和3株。Class 1 integrons以及其抗藥基因片匣，使用聚合酶連鎖反應、限制酶切割及核酸定序來分析。在81株具ESBLs的克雷白氏肺炎桿菌中就有78株 ( 96.3% ) 具有class 1 integrons，顯示ESBLs與class 1 integron常同時存在於克雷白氏肺炎桿菌中，class 1 integron攜帶之基因片匣主要包括trimethoprim抗藥基因 ( dfr5，12 )、streptomycin抗藥基因 ( aadA1，2 )、erythromycin抗藥基因 ( ereA2 )、chloramphenicol抗藥基因 ( catB3 )、ampicillin抗藥基因 ( blaOXA-30 )、rifampin抗藥基因 ( arr3 ) 與aminoglycoside-6’-N-acetyltransferase酵素 ( aac(6’)-Il，aac(6’)IIc，aac(6’)Ib ) 等藥物之抗藥基因片匣，其中以帶有dfr12-orfF-aadA2這3種片匣組合的菌株比率最高。
進一步分析bla基因與class 1 integrons於菌體內存在位置，發現兩者通常位於同一質體上。此外，接合試驗顯示bla基因所在質體大多具有轉移能力 ( 65/81，80.2% )，而且integrons多可伴隨著同時轉移 ( 53/65，81.5% )。本研究結果顯示，由於bla基因與class 1 integrons多同時存在於菌體內的同一質體上，故於藥物使用的選擇壓力之下，不僅易同時篩選出ESBLs與class 1 integrons所帶的抗藥性，且因bla基因與class 1 integrons多能一起隨著質體轉移，進而使多重抗藥性的散佈機會大大增加。

關鍵字

超廣效性乙內醯胺酶

並列摘要

無資料

並列關鍵字

Extended-Spectrum β-Lactamases

參考文獻

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