利用饋料醱酵生產納豆激酶之研究

Production of Nattokinase by Fed-batch Fermentation

范瓊藝(Chiung-yi Fan)

指導教授 ： 段國仁

大同大學/工程學院/生物工程學系所/碩士(2006年)

摘要

從市售納豆健康食品中分離篩選出可生產納豆激酶 ( Nattokinase ) 的菌株A，藉由液態搖瓶培養生產納豆激酶，其最適條件以3%黃豆粉、3% 葡萄糖，並額外添加0.5% CaCO3、 0.5% KH2PO4和0.1% MgSO4‧7H2O為培養基，在溫度37℃、180 rpm的條件下進行培養，經醱酵培養48小時之後得到酵素最佳活性值27 U/mL。
批次醱酵試驗結果指出，接種10%的種菌液，以1 vvm 之通氣量，配合300 rpm 的攪拌速度，於37℃下進行放大培養，結果指出菌株A於培養第42 小時出現最佳之酵素活性 ( 81.3 U/mL )。
饋料批次醱酵分為兩階段，第一階段以葡萄糖為主，目的是要提高細胞濃度，接著以黃豆粉為氮源以及酵素生產的誘導劑，在醱酵培養第48 小時出現最佳之酵素活性 ( 330 U/mL )。
在酵素的pH穩定性及溫度穩定性實驗中，粗酵素液之最穩定的pH值在6.0〜7.0，將粗酵素一保存在4℃，1個月後，仍可維持65%的活性。

關鍵字

納豆激酶 ； 饋料醱酵

並列摘要

Abstract
We isolate a strain A from natto purchased from the local market. It was employed for the production of nattokinase by shaking culture at 180 rpm and 37 C. The optimum medium for the shaking culture was (g/l) : 3% soybean flour, 3% glucose, 0.5% CaCO3, 0.5% KH2PO4, 0.1% MgSO4．7 H2O. The nattokinase activity of 27 unit/ml was achieved after 48 h shaking culture.
The batch fermentation was performed using the same medium as the shaking culture at 300 rpm, 1 vvm of aeration, 37 C. 81.3 unit/ml of nattokinase activity was achieved after 42 h cultivation.
Fed-batch fermentation was initialized by using the batch fermentation. Various concentrations of glucose, yeast extract and soybean flour were employed to formulate the feeding medium. 330 unit/ml nattokinase was achieved after 48 h cultivation for the fed-batch fermentation.
The crude enzyme was stable at pH 6~7, and 65 % activity retained for the crude enzyme stored at 4 C for 1 month.

並列關鍵字

nattokinase

參考文獻

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