植物內生菌萃取物之生物活性評估

本研究由13種中草藥植物中分離出22株植物內生菌，並將此22株菌分別於potato dextrose broth進行發酵培養，進而分別以CHCl3、n-BuOH、EtOH進行萃取。將所得之萃取物分別進行生物活性研究 (抗血小板凝集、抗細胞毒、抗發炎等)。其中抗血小板凝集實驗方面，10株內生菌 (Rahnella aquatilis、Methylobacterium aquaticum 、Pantoea agglomerans、Rhodotorula sp.、Pseudomonas sp.、Colletotrichum crassipes、Penicillium paxilli、Penicillium citrinum、Penicillium sp.) 的萃取物具有抑制由collagen所誘導之血小板凝集活性，其IC50 介於: 19.85 - 87.64 μg/ml。此外，4株內生菌 (Rahnella aquatilis、 Pantoea agglomerans、Rhodotorula sp.、Penicillium paxilli) 則具有抑制thrombin所誘導之血小板凝集之活性 (IC50 : 42.80 - 61.54 μg/ml)。在抗癌細胞毒殺實驗方面，則有11株內生菌 (Bacillus licheniformis、Curtobacterium citreum、Pantoea agglomerans、Rhodotorula sp.、Brochothrix themosphacta、Colletotrichum crassipes、Penicillium paxilli、Fusarium sp.、Penicillium citrinum、Penicillium sp.) 之萃取物分別對於A549、HepG2、MCF7、Hep3B、MDA-MB-231等癌細胞株具有毒殺作用 (IC50 : 0.12 - 19.83 μg/ml)。其中Rhodotorula sp. 菌株之CHCl3層萃 XIV 取物、Curtobacterium citreum菌株之CHCl3層萃取物，對HepG2細胞株具有高度選擇性之細胞毒殺作用；Bacillus licheniformis 菌株之CHCl3層萃取物與Fusarium sp. 菌株之H2O層萃取物，則對MCF-7細胞株具有選擇性細胞毒殺作用；Pantoea agglomerans 菌株之EtOH萃取物，則對A-549細胞株具有選擇性細胞毒殺作用。由於自紫背草 (Emilia sonchifolia (L.) DC.) 所分離之內生菌Rahnella aquatilis萃取物之CHCl3層具有抗血小板凝集之作用，故進而進行該菌株所含二次代謝產物之分離純化共得到6個化合物，其中包含1個isoalloxazine類化合物lumichrome (1)；2個isoflavones: genistein (2)、daidzein (3)；2個cyclic peptides: cyclo-Pro-Val (4)、cyclo-Pro-Phe (5)及1個芳香環化合物methyl 2,4,5-trimethoxy benzoate (6)。化合物皆經由光譜分析和文獻比對確認其結構。