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應用農桿菌(Agrobacterium tumefaciens)做為絲狀真菌基因轉殖工具

Application of Agrobacterium tumefaciens as a Tool for Genetic Transformation in Filamentous Fungi

摘要


當植物受傷而釋放出酚化物時,可誘導農桿菌(”Agrobacterium tumefaciens”)啟動癌腫誘導質體(tumour-inducing plasmid)中的一連串”Vir” genes,進而將Ti-plasmid上的T-DNA複製並轉移到寄主植物細胞中,並產生植物生長調節物質,造成植物細胞不正常的增生而形成癌腫。基於此特性,農桿菌已漸被用來做為真菌轉殖及基因研究工具。與傳統的方法比較,在真菌上利用農桿菌進行轉殖,可得到較佳的轉殖效率,其原因除了VirE2蛋白可以保護T-DNA不受寄主細胞中nucleases的傷害外,VirD2蛋白可能在T-DNA插入寄主基因體(genome)之後,扮演著DNA修復的角色。近年來農桿菌亦多被應用於基因置換之研究,在基因置換實驗中需建構一個置換盒,置換盒中包含有選殖標誌基因(selectable marker)及建構於選殖標誌基因兩側,與目標基因具同源性的基因片段(homologous gene fragment)。影響置換效率有許多因子,其中同源性基因片段的長度即為一重要因素,研究發現除了基因片段長度外,序列本身似乎更為重要。

關鍵字

農桿菌 基因轉殖 絲狀真菌

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