大豆根瘤菌Sinorhizobium Fredii CCRC15769之聚半乳糖醛酸酶之生化特性

Biochemical Characteristics of Polygalacturonase in Sinorhizobium fredii CCRC15769

林育諄(Yu-Juen Lin) ； 胡淳怡(Chun-Yi Hu) ； 林良平(Liang-Ping Lin)

《臺灣農業化學與食品科學》 42卷2期 (2004/04) Pp. 125-131

https://doi.org/10.6578/TJACFS.2004.018

摘要

聚半乳糖醛酸酶 (polygalacturonase, PG) 可能為根瘤菌與豆科植物根部進行共生固氮作用時，根瘤菌分解植物細胞壁的關鍵酵素。利用聚半乳糖醛酸(polygalacturonic acid) 當作基質，經PG作用五小時後，以BCA(2,2'-bicinchonic acid) 溶液測定反應液中顏色變化 (570nm) 定量酵素活性。本試驗以Sinorhizobium fredii CCRC 15769作為研究PG的菌株，嘗試以多種碳源誘導培養，並添加類黃酮誘導，以提高PG的產量。結果顯示，以myo-inositol為碳源可以得到較高的PG活性；而添加果膠、naringenin、DHF並不能對於PG活性有明顯的提升，genistein則具有提升活性的效果。菌體培養後經超音波破菌得到的粗酵素液，其作用最適pH為5.5，最適溫度為35℃。粗酵素液經硫酸銨劃分後，收集飽和濃度40-60％之沈澱，以20mM NaOAc緩衝液透析，離心後上清液通入Phenyl Sepharose 6之疏水性管柱，收取活性部分後透析，並繼續通入DEAE Spharose陰離子交換管柱，層析後收集具有活性的分劃，最後比活性(U/mg)為0.152，純化倍率為52.5，回收率為0.04%。

關鍵字

聚半乳糖醛酸酶 ； 大豆根瘤菌 ； 類黃酮

並列摘要

無資料

並列關鍵字

polygalacturonase ； Sinorhizobium fredii ； flavonoid