蛋白酶體抑制劑bortezomib (Velcade)對於大鼠視網膜的缺血-再灌流損傷之保護效果

The protective effects of proteasome inhibitor bortezomib (Velcade) on ischemia-reperfusion injury in rat retina

陳芳婷(Fang-Ting Chen)

指導教授 ： 楊長豪

國立臺灣大學/醫學院/臨床醫學研究所/碩士(2012年)

https://doi.org/10.6342/NTU.2012.00192

摘要

研究目的
研究蛋白酶體抑制劑bortezomib (Velcade) 對於大鼠視網膜的缺血-再灌流損傷之保護效果。

研究方法
將大鼠隨機分組，於引發視網膜缺血-再灌流損傷之前，先分別給予食鹽水、低劑量的bortezomib (0.05mg/kg)、或高劑量的bortezomib (0.2mg/kg) 作處理，來觀察各組大鼠間的差異。本實驗以視網膜電位圖來評估網膜功能的變化；以聚合酵素鏈鎖反應 (PCR) 和西方點墨法 (western blot) 來定量發炎因子 (包括iNOS、ICAM-1、MCP-1、TNF-α)、抗氧化蛋白 (heme oxygenase-1、thioredoxin、peroxiredoxin) 和促細胞凋亡蛋白 (p53、bax) 等表現量；以免疫螢光染色法來偵測視網膜上iNOS、氧化標記 (nitrotyrosine、8-OHdG、acrolein)、NF-κB p65和CD 68等蛋白的表現；以TUNEL染色法標記凋亡的視網膜細胞；最後以Neu-N免疫染色法觀察視網膜神經節細胞的密度。

研究結果
視網膜電圖顯示網膜在受到缺血-再灌流損傷後b波會下降，而先以bortezomib治療 (特別是高劑量) 的大鼠可降低視網膜功能的受損。Bortezomib可成功降低視網膜缺血-再灌流損傷後造成的發炎因子、抗氧化蛋白、促細胞凋亡蛋白、氧化壓力標記的上升，以及減少NF-κB p65和CD 68陽性細胞的增加。Bortezomib也能夠減少視網膜各層細胞在缺血-再灌流損傷後的細胞凋亡；另外，於給予食鹽水和低劑量bortezomib處理的這兩組大鼠可發現其視網膜神經節細胞密度於缺血-再灌流損傷後會明顯減少，但在高劑量bortezomib治療組的細胞密度則與正常大鼠無統計上顯著之差異。

結論
本實驗證實bortezomib在大鼠視網膜的缺血-再灌流損傷中具有功能和結構上的保護效果，此藥物可抑制缺血-再灌流損傷後的NF-κB活化、減少發炎訊息的傳導、以及降低視網膜的氧化壓力。

關鍵字

蛋白酶體抑制劑 ； 視網膜 ； 缺血-再灌流損傷

並列摘要

無資料

並列關鍵字

Proteasome inhibitor ； retina ； ischemia-reperfusion injury

參考文獻

Abraham, E. (2000). "NF-kappaB activation." Crit Care Med 28(4 Suppl): N100-4.

Arai-Gaun, S., N. Katai, et al. (2004). "Heme oxygenase-1 induced in muller cells plays a protective role in retinal ischemia-reperfusion injury in rats." Invest Ophthalmol Vis Sci 45(11): 4226-32.

Archer, D. B. (1976). "Tributary vein obstruction: pathogenesis and treatment of sequelae." Doc Ophthalmol 40(2): 339-60.

Asai, A., N. Tanahashi, et al. (2002). "Selective proteasomal dysfunction in the hippocampal CA1 region after transient forebrain ischemia." J Cereb Blood Flow Metab 22(6): 705-10.

Barone, F. C., B. Arvin, et al. (1997). "Tumor necrosis factor-alpha. A mediator of focal ischemic brain injury." Stroke 28(6): 1233-44.