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  • 學位論文

石蒜雙核型雜種未減數配子型及近同源重組之核型與GISH分析

Unreduced Male Gamete Type and Homoeologous Recombination in MT-A Dikaryotype Hybrids of Spider Lily (Lycoris spp.) Mediated Karyotype and GISH Analyses

指導教授 : 許圳塗
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摘要


石蒜(Lycoris spp.)人工合成MT-A雙核型雜種2n=18=(4M+3T)+(11A)及2n=19=(3M+5T)+(11A)可產生大約25%有活力花粉,但為不稔實。雙核型雜種藉由不犧牲母株之試交法及胚挽救培養,以細胞學分析試交代檢定出186個雄配子中有6個未減數雄配子(3.23%),其染色體數分別為17、18(2個)、19(2個)、20,各帶有22或近22總臂數,是為石蒜屬基因組基本數11之兩倍,故歸之為未減數配子。藉由細胞學分析可直接將2n配子之發生途徑及遺傳屬性區分為第一分裂復合(FDR)及第二分裂復合(SDR)。其中5個的核型各為2n=17=4M+2T+11A(4×2+2+11=21臂、1T缺失),2個為18=4M+3T+11A (4×2+3+11=22臂),19=3M+5T+11A(22臂,由第2個雜種產生)及19=5M+3T+11A (24臂、超額1M),從染色體數目及形態標誌皆與親本型相同,即由FDR而來。進一步由基因組原位雜交法(GISH)分析,可將FDR再區分為重組型(recombinant type)及非重組型。4M+2T+11A配子總計有15處置換段節;3M+5T+11A配子有2處置換段節;5M+3T+11A配子總計有14處置換段節,顯示MT與A基因組間有部分近同源基因重組。而2個4M+3T+11A配子則無置換片段標誌,換言之,其遺傳組成完全像雙核型雜種親本型(MT+A)。細胞學檢定出1個的核型為2n=20=2M+4T+14A(22臂),此配子核型符合理論染色體重組型,同時伴生加倍染色體組,如同省略掉第二分裂,可歸之為SDR。GISH分析顯示2M+4T+14A配子帶有10對染色子體,其中有16臂出現置換段節,每對兩條染色子體之置換位置與大小皆相同,可印證為省略第二分裂之SDR。石蒜雙核型雜種能夠形成多樣遺傳起源之未減數配子,有助開創多樣性有性多倍體種化,同時多變異2n配子亦有利多倍體育種選拔利用。

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參考文獻


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