海水白點蟲，一種感染海水魚類的寄生性原蟲，基因型與血清型之分析

Genotype and Serotype Analysis of Cryptocaryon irritans, a Parasitic Protozoa Isolated from Marine Fish

林彥宏(Yen-Hong, Lin)

指導教授 ： 宋延齡

國立臺灣大學/生命科學院/動物學研究所/碩士(2012年)

https://doi.org/10.6342/NTU.2012.02458

摘要

為了瞭解寄生蟲的性質，包括基因型和血清型，以及疫苗可施用的魚種範圍，
本研究收集台灣與大陸閩南地區白點徵狀病魚。首先，從寄生蟲囊孢選殖核醣體
去氧核醣核酸(rDNA)序列，鑑定海水白點蟲，其次利用rDNA 序列分析不同來源
寄生蟲之親緣關係及基因型別。再選殖制動蛋白去氧核醣核酸互補序列(iAg cDNA
sequence)，分析不同來源寄生蟲免疫原之親緣關係，提供開發多價疫苗的資訊。
最後，分析纖毛帅蟲血清型，作為評估疫苗功效以及追蹤傳染病源之依據。
從2007 年迄2012，從台灣和中國大陸閩南地區取得 78 尾病魚，收集到 47
株寄生蟲，選殖、定序並比對其囊胞體部分 18 S、ITS-1、5.8 S、ITS-2 以及部分
28 S rDNA 序列，鑑定為海水白點蟲。分析被感染的 78 尾病魚，分類上屬於 31
屬42 種，包含食用魚和觀賞魚。分析本研究選殖的 47 條海水白點蟲 rDNA 序列
以及21 條NCBI參考株 rDNA 序列之親緣關係顯示存在五個群簇：:群簇 I (大陸地
區分離株)占54 %；群簇 II和群簇 IV(美國和日本分離株)各占16 %和 15%；群簇
III (南海以西地區分離株) 占9 %；群簇V (高雄、澎湖特有分離株)占 3%；而無法
分群的Aus. B與Aus. C 兩株則分別各佔1 %。因此推測海水白點蟲的分化，導致
品系間序列的差異，除地理因素影響外，可能與鹽度有關，而與魚種或溫度無關。
選殖、定序並排列比對 15 條iAg 胺基酸序列發現第 126 個aa 位置上為終結
密碼子；另外，每條 iAg 胺基酸序列中終結密碼子的個數與位置都坐落在不同點，
顯示iAg 胺基酸序列的變異性。雖然 iAg具變異性，本研究鑑定之 092208_Hm_TT
iAg 較接近日本的G37 iAg (相似度89.8%) ，而111708_Cs_TT iAg則較近日本的G32
iAg (相似度 87.6%)。親緣關係顯示iAg存在三個群簇。
免疫螢光染纖毛帅蟲發現兔抗血清僅辨認部分纖毛帅蟲，而非全部纖毛帅蟲，
顯示040609_Ec_KT 纖毛帅蟲非純品系。此結果除提供檢驗寄生蟲純度的簡易方
法，也反映同一隻魚可被多種不同血清型之海水白點蟲混合感染，建議開發疫苗時須考慮多價或具交叉反應之纖毛帅蟲。綜合制動分析和ELISA 結果顯示海水白
點蟲至少存在四種不同血清型，其中以 111708_Cs_TT 所代表的血清型最顯著。
本研究更發現不同基因型的海水白點蟲，可能表現相同血清型。然而目前資料僅
能說明111708_Cs_TT亞洲主要血清型，無法得知海水白點蟲究竟存在多少種血
清型，需要進一步收集資料，做為開發多價疫苗之基礎。

關鍵字

海水白點蟲 ； 基因型 ； 血清型

並列摘要

無資料

並列關鍵字

Cryptocaryon irritans ； Genotype ； Serotype

參考文獻

趙嘉本. 2010行政院農業委員會家畜衛生試驗所-99年度建置水產動物生產醫學石斑魚教育訓練課程

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