共焦螢光顯微系統之設計與應用

Design and Application of Confocal Fluorescence Microscopy System

蕭志遠(Chih-Yuan Hsiao)

指導教授 ： 詹國禎

共同指導教授 ： 董成淵

國立臺灣大學/電機資訊學院/電機工程學研究所/碩士(2004年)

https://doi.org/10.6342/NTU.2004.01488

摘要

共焦顯微鏡對於厚樣品的觀測是一非常有用的工具，藉由它可以取得內部之清晰影像。其主要特色如下，它是一種非侵入式的光學觀測技術，同時它更提供了空間濾波的特性，因此可以避免非焦平面之雜訊的干擾，進而取得樣品之切片影像。共焦顯微鏡亦可搭配螢光顯微技術，利用對生物組織特定部位染色，來突顯此部位的訊號，所以可得到對比度較好的生物影像。基於以上種種特點，它廣泛地被運用在生物醫學領域的研究上。在本論文中，我們設計且架設一台共焦螢光顯微系統，之後便針對一些系統特性進行評估，在解析度的測試方面，如以波長632.8 ，數值孔徑0.65的情況下，評估本系統之橫向與縱向解析率大約是0.8 與2.7 。在生物樣品的測試上，我們利用洋蔥表皮與老鼠皮膚作為樣品，驗證系統的光學切片能力。由實驗的結果得知，系統在解析度上可達到高的空間解析率，亦可利用於生物樣品的光學切片。

關鍵字

共焦顯微術

並列摘要

共焦顯微鏡對於厚樣品的觀測是一非常有用的工具，藉由它可以取得內部之清晰影像。其主要特色如下，它是一種非侵入式的光學觀測技術，同時它更提供了空間濾波的特性，因此可以避免非焦平面之雜訊的干擾，進而取得樣品之切片影像。共焦顯微鏡亦可搭配螢光顯微技術，利用對生物組織特定部位染色，來突顯此部位的訊號，所以可得到對比度較好的生物影像。基於以上種種特點，它廣泛地被運用在生物醫學領域的研究上。在本論文中，我們設計且架設一台共焦螢光顯微系統，之後便針對一些系統特性進行評估，在解析度的測試方面，如以波長632.8 ，數值孔徑0.65的情況下，評估本系統之橫向與縱向解析率大約是0.8 與2.7 。在生物樣品的測試上，我們利用洋蔥表皮與老鼠皮膚作為樣品，驗證系統的光學切片能力。由實驗的結果得知，系統在解析度上可達到高的空間解析率，亦可利用於生物樣品的光學切片。

並列關鍵字

confocal microscopy

參考文獻

1、E. Betzig and J. K. Trautman, “Near-field optics: microscopy, spectroscopy, and surface modification beyond the diffraction limit,” Science 257, 189（1992）.

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