新miRNA P-27-5p影響人類癌細胞週期及其分子機轉之探討

Effects of a Novel miRNA P-27-5p on Human Cancer Cell Cycle and the Related Molecular Mechanism

張雅雅(Ya-Ya Chang)

指導教授 ： 阮雪芬

國立臺灣大學/生命科學院/分子與細胞生物學研究所/碩士(2009年)

https://doi.org/10.6342/NTU.2009.02872

摘要

微型核醣核酸microRNA（miRNA）為一群內生型，長度在20-24個鹼基之間的核酸，對於其標靶基因能夠藉著與其訊息RNA (mRNA)的3’-非編碼區 (3’-UTR) 結合來進行負向調控，以抑制蛋白質的合成。最近的研究中發現微型核醣核酸除了與細胞的生長發育有密切關係之外，與癌症的發生與發展有密切的關係。此外，微型核醣核酸在細胞訊息傳遞路徑中所扮演的角色也逐漸被發現，但其確切的功能尚未完全解開。李文雄院士、施純傑博士與我們組成的團隊於2008發現並證實一個新的微型核醣核酸P-27-5p，我們以數個人類癌細胞株為材料來證實它的功能。在細胞存活率實驗中發現P-27-5p會導致細胞生長減緩，進一步細胞週期分析發現P-27-5p會使細胞停留在G0/G1時期。經由預測結果得知v-erb-b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 3 (ErbB3)為P-27-5p的標靶基因，我們經由冷光酶活性測定分析以及西方墨點法驗證ErbB3確實為P-27-5p的標靶基因。在前人的研究中發現，ErbB3會藉著活化phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/AKT訊息傳遞路徑來促使細胞增生，並且在很多癌細胞中其ErbB3為大量表現，導致癌細胞擁有快速的增生能力。從西方墨點法中證實P-27-5p會抑制ErbB3的表現，並抑制AKT的磷酸化。總而言之，本項研究發現P-27-5p會抑制ErbB3的表現，進而抑制其下游的訊息傳遞路徑，導致細胞週期停留在G0/G1時期，而使癌細胞生長受到抑制 。

關鍵字

微型核醣核酸 ； 細胞週期 ； 乳癌 ； 流式細胞儀 ； 人類上皮因子接受體

並列摘要

無資料

並列關鍵字

miRNA ； cell cycle ； breast cancer ； flow cytometry ； ErbB3

參考文獻

1. Lee, R.C., R.L. Feinbaum, and V. Ambros, The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. Cell, 1993. 75(5): p. 843-854.

2. Griffiths-Jones, S., et al., miRBase: tools for microRNA genomics. Nucleic Acids Res, 2008. 36(Database issue): p. D154-8.

3. Lee, Y., et al., MicroRNA genes are transcribed by RNA polymerase II. Embo J, 2004. 23(20): p. 4051-60.

4. Cai, X., C.H. Hagedorn, and B.R. Cullen, Human microRNAs are processed from capped, polyadenylated transcripts that can also function as mRNAs. Rna, 2004. 10(12): p. 1957-66.

5. Lee, Y., et al., The nuclear RNase III Drosha initiates microRNA processing. Nature, 2003. 425(6956): p. 415-9.