人類MCPIP1抗A型流感病毒感染機制之研究

The study of the antiviral mechanism of MCPIP1 against influenza A virus infection

柯品臣(Pin-Chen Ko)

指導教授 ： 梁有志

共同指導教授 ： 林仁傑

臺北醫學大學/醫學科技學院/醫學檢驗暨生物技術學系/碩士(2013年)

摘要

Monocyte chemotactic protein-1-induced protein 1 (MCPIP1)，也被稱為Zc3h12a，在負向調控發炎反應上扮演一個重要的角色。MCPIP1 蛋白質包含著高度保存性的CCCH-type zinc finger domain 與Nedd4-BP1, YacP Nuclease(NYN) domain，分別具有RNA binding、ribonuclease (RNase) activity 及deubiquitinase (DUB) function 的特性。過去文獻指出，人類MCPIP1 蛋白質展現廣泛抑制多種RNA及DNA病毒感染的能力，包括Japanese encephalitis virus(JEV)、Dengue fever virus 2 (DEN-2)、sindbis virus、encephalomyocarditis virus及adenovirus。在本篇研究中，人類MCPIP1 蛋白質可以抑制A 型流感病毒(influenza virus; IAV)的感染。進一步利用不同MCPIP1 蛋白質突變型探討MCPIP1 各功能性domain 是否參與對抗IAV 感染的機制，不具RNase 及DUB功能的突變型MCPIP1 (D141N)、RNase (+)/DUB (-)的MCPIP1 (C157A)及RNase (-)/DUB (+)的MCPIP1 (D225/226A)皆失去抑制A 型流感病毒感染的能力。在CCCH type Zinc finger domain 發生突變的五種突變型中，西方墨點法顯示MCPIP1 (C306R)、(C312R)、(C318R)、(H322R)及(Δ305-325)皆無法抑制
A 型流感病毒的感染，但在病毒效價測定的結果中，MCPIP1 (C306R)、(C318R)及(H322R)仍保有抑制病毒複製的能力。proline-rich domain 缺失的突變型MCPIP1 (Δ458-536)不具有抑制A 型流感病毒感染的能力。而in vitro cleavage assay 的結果顯示，MCPIP1 蛋白質的RNase 活性無法降解IAV 的八段cRNA。A 型流感病毒感染A549 細胞會引誘proinflammatory molecules 的產生，但不會大量引發內生性MCPIP1 表現。綜合我們的實驗結果，在MCPIP1 蛋白質抑制A 型流感病毒感染過程中，需要RNase activity 及DUB function 同時存在，而RNA binding 及oligomerization 能力也參與其中。

關鍵字

MCPIP1 ； A型流感病毒

並列摘要

無資料

並列關鍵字

MCPIP1 ； influenza A virus

參考文獻

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