利用In vitro selection篩選DNA型藥物與其和日本腦炎病毒封套蛋白第三區塊交互作用之研究

In vitro selection and characterization of DNA aptamer targeting the domain III of Japanese encephalitis virus envelope protein

吳毓婷(Yu-Ting Wu)

指導教授 ： 程家維

國立清華大學/生命科學院/生物科技研究所/碩士(2009年)

https://doi.org/10.6843/NTHU.2009.00336

摘要

日本腦炎(Japanese encephalitis virus, JEV)係感染日本腦炎病毒引起的急性腦膜腦炎，大約五百個病例中會有一個嚴重個案會惡化成腦炎，其被視為是造成人類致病率跟死亡率的重要病原體，世界衛生組織(The World Health Organization)估計全球每年有超過五萬件日本腦炎事件發生！雖然近年來台灣地區日本腦炎的感染有下降的趨勢，但每年仍然有報告的病例。儘管日本腦炎衝擊著醫療及公共衛生，對於這類感染，在化學預防和化學治療中，卻無有效的藥物。
套膜E醣蛋白(envelope protein；E protein)為主要的中和性單株抗體(neutralizing antibodies)所辨認之區域，且在病毒入侵後所引發的免疫反應機制及病毒的附著、融合和穿透的機制中，扮演著重要的角色。 日本腦炎病毒也被認為是利用封套蛋白E和細胞表面接收器鍵結而引發細胞吞噬作用(receptor-mediated endocytosis)作為感染細胞的開始，所以藉由研究日本腦炎病毒外套膜蛋白與宿主細胞膜上的接受器之間的結合機制，可以進而設計抑制病毒進入細胞的藥物或疫苗。
在此，我們利用SELEX (systematic evolution of ligands by exponential enrichment)的技術，從DNA library篩選出對日本腦炎病毒有高親和性及專一性的序列，序列中大部分都包含 CCAACGCAAGCACCATCG的序列區段；並利用螢光光譜儀測量S18對JEV的鍵結常數，為66.3 nM；以及測試S18的穩定度。研究果並顯示出所篩選出的S18有效抑制日本腦炎及登革熱病毒的感染。因此，S18是具有潛力成為抗病毒的藥物。

關鍵字

日本腦炎病毒

參考文獻

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References

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