含cbMSC/HUVEC核層細胞球體的製備、性質評估與其於血管新生之應用

江仁豪

指導教授 ： 宋信文

國立清華大學/工學院/化學工程學系/碩士(2011年)

摘要

細胞治療在組織工程領域上，為一相當具有前瞻性的治療方法。曾有研究群利用注射幹細胞進行組織再生的治療，但其效果有限。原因在於收集細胞時用酵素脫附細胞的動作，會破壞細胞與細胞間的連結性，因此可能會影響後續細胞移植的治療效果。本實驗室先前已開發出細胞球體生產系統，利用細胞不會貼附在甲基纖維素水膠的特性，製備大小均一且可經由針頭注射的細胞球體。實驗結果顯示，細胞球體具有完整的細胞外間質及黏附性蛋白，注射後，嵌入肌肉間隙中並黏附於新生環境裡，而有效的留置於體內。本研究利用人類臍帶血間葉幹細胞(human cord-blood mesenchymal stem cells, cbMSC)與人類臍帶靜脈內皮細胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)在體外共同培養成3-D核層細胞球體，並探討此一核層細胞球體的增生、分佈及最佳化等特性。體外實驗部分，我們先行探討cbMSC/HUVEC核層細胞球體的形成機制，結果發現當cbMSC作為核時，才可形成核層細胞球體。另外我們藉由類血管網路形成(Tube Formation Assay)評估cbMSC/HUVEC核層細胞球體分化血管之能力及探討 cbMSC/HUVEC 細胞數比例是否會影響類血管網路形成能力。結果顯示以 cbMSC 與 HUVEC 比例1：1其類血管網路結構形成的速度及完整性是最好的。我們也分析了SMA、SM22、MYH10、VEGF、TGF-β1、Ang1-1此六種與血管形成相關的基因，除TGF-β1外，其餘五種基因的表現量隨時間增長有上升的趨勢。體內實驗部分，我們把cbMSC/HUVEC核層細胞球體與Matrigel混合，進行老鼠背部皮下注射，探討其分部、增生及是否有形成血管網路之情形。結果顯示，cbMSC/HUVEC核層細胞球體於7天後已部份分化為血管，並與宿主血管連結，證明其確實有分化為血管之能力。

關鍵字

血管新生 ； 細胞治療 ； 細胞球體

並列摘要

無資料

並列關鍵字

angiogenesis ； cells therapy ； cell bodies

參考文獻

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