DNA與樹枝狀高分子形成奈米微粒結構分析與基因表現之探討

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魏明正(Wei Ming Cheng)

指導教授 ： 宋信文

國立清華大學/工學院/化學工程學系/碩士(2008年)

摘要

Dendrimer具樹枝狀的結構，可作為新穎的基因載體。本實驗利用Dendrimer結構上帶有大量的胺基，製備三種不同質子化程度的Dendrimer，分別為dp=0.1、dp=0.3及dp=0.9與直鏈狀DNA (pEGFP-N2)形成奈米微粒後，以小角度散射分析其內部結構。其中dp=0.1的奈米微粒內部結構呈現平面四角形，dp=0.3呈現平面四角形與不規則共存形態，dp=0.9屬於完全不規則的分佈形態。除此之外，亦分析其粒徑大小、表面電荷及TEM粒子形態。接著以此三種內部結構的奈米微粒進行HT1080細胞轉染實驗，結果顯示dp=0.3的奈米微粒相較於dp=0.1與dp=0.9有較高的細胞轉染效率與基因表現量。再利用FITC接枝於Dendrimer表面胺基上，用以追蹤奈米微粒被細胞吞食的情形，結果顯示細胞吞噬較多dp=0.3的奈米微粒。最後為探討奈米微粒胞飲的機制，以抑制劑wortmanin抑制macropinocytosis及Filipin、MβCD、Genistein抑制caveolin-dependent endocytosis後，可以降低細胞吞食奈米微粒的能力，尤其以dp=0.3的效果較為顯著。更進一步的研究，則以anti-caveolin-1的抗體標定細胞，發現caveolin確實參與了Dendrimer/DNA奈米微粒的胞飲過程。以上的實驗結果，顯示Dendrimer/DNA奈米微粒的幾何形狀會影響到基因轉染的效率。

關鍵字

樹枝狀高分子

並列摘要

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並列關鍵字

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參考文獻

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