發展可包裹RNA的合成腸病毒71型 類病毒顆粒疫苗

Development of RNA-encapsidated Synthetic Enterovirus 71 Virus-like Particle Vaccine

蘇元瑜

指導教授 ： 胡育誠

國立清華大學/工學院/化學工程學系/碩士(2014年)

摘要

腸病毒71型(Enterovirus 71)是手足口症最常見的病原之一，是目前已知六十幾種的腸病毒中致病力最高且最易引發神經性併發症的一種，對於五歲以下的幼童更具有高致死率。在台灣每隔數年便有疫情傳出，2012年也曾爆發大規模流行，重症案例高達一百五十九例，因此腸病毒71型的疫苗開發更顯迫切。我們過去開發以重組桿狀病毒/昆蟲細胞表現系統來生產腸病毒71型類病毒顆粒疫苗，此類病毒顆粒雖然在大小、外觀與蛋白組成上與真實病毒外殼相似，但由於缺乏包裹病毒RNA的來源與機制，因此外殼VP0蛋白沒有包裹RNA所引起的自發性切割為VP2及VP4蛋白，無法形成成熟的病毒外殼。未成熟的腸病毒顆粒在免疫抗原性及顆粒穩定性上皆可能較成熟顆粒為差，因此本研究中我們嘗試建構一系列的重組桿狀病毒，以表現腸病毒71型病毒顆粒包裹RNA的必要蛋白與合成RNA，形成有包裹RNA的合成腸病毒71型類病毒顆粒，來引發VP0蛋白正確切割提升類病毒顆粒的免疫抗原性及顆粒穩定性，增加腸病毒71型類病毒顆粒疫苗的競爭力，但結果顯示我們的實驗設計無法生產有包裹RNA並且引發VP0蛋白切割的合成腸病毒71型類病毒顆粒。

關鍵字

腸病毒 ； 類病毒顆粒

參考文獻

Ansardi DC, Porter DC, Anderson MJ, Morrow CD. 1996. Poliovirus assembly and encapsidation of genomic RNA. Adv Virus Res 46:1-68.

Arnold E, Luo M, Vriend G, Rossmann MG, Palmenberg AC, Parks GD, Nicklin MJ, Wimmer E. 1987. Implications of the picornavirus capsid structure for polyprotein processing. Proc Natl Acad Sci U S A 84(1):21-25.

Basavappa R, Syed R, Flore O, Icenogle JP, Filman DJ, Hogle JM. 1994. Role and mechanism of the maturation cleavage of VP0 in poliovirus assembly: structure of the empty capsid assembly intermediate at 2.9 A resolution. Protein Sci 3(10):1651-1669.

Bedard KM, Semler BL. 2004. Regulation of picornavirus gene expression. Microbes Infect 6(7):702-713.

Borodavka A, Tuma R, Stockley PG. 2013. A two-stage mechanism of viral RNA compaction revealed by single molecule fluorescence. RNA Biol 10(4):481-489.