利用共聚焦掃描顯微鏡研究螢光分子在溶液中的動力學現象

Using Confocal Microscopy to Study the Dynamic Process of Single Fluorescence Molecule in Solution

陳鐶中(Huan-Jung Chen)

指導教授 ： 林金全

國立臺灣大學/理學院/化學研究所/碩士(2007年)

https://doi.org/10.6342/NTU.2007.00291

摘要

結合了共聚焦掃描顯微術、螢光相關光譜(Fluorescence correlation spectroscopy)技術，與電腦處理速度的進步，螢光相關光譜的技術應用在物理、化學、與生物領域上愈來愈頻繁。本篇論文主要是結合了共聚焦掃描顯微術與螢光相關光譜技術，觀察螢光奈米鑽石粒子與岩藻糖水解酶和抑制劑間的動力學現象。實現發現螢光奈米鑽石粒子而隨著觀察時間的增加，螢光強度也隨著增強，而擴散時間也變長與螢光奈米鑽石粒子在長時間下會有聚集(aggregation)的現象相符合。岩藻糖水解酶與抑制劑間的研究中，我們量測出當抑制劑還沒有與岩藻糖水解酶結合時，抑制劑的擴散係數(diffusion coefficient)為205.3±8.2 ，當岩藻糖水解酶與抑制劑結合時擴散係數變為86.0±2.0 ，這是由於岩藻糖水解酶的分子量(52000Da)與抑制劑的分子量(829.339)有明顯的差距，所以擴散係數有明顯的改變。另外我們也嘗試求得岩藻糖水解酶與抑制劑間的作用力，在25℃下測量出當岩藻糖水解酶的濃度在5nM、25nM、50nM下其解離平衡常數為(8.89±1.58)E-9、(9.49±2.14)E-9、(1.99±0.36)E-8，與抑制劑和岩藻糖水解酶有高結合力的現象符合。

關鍵字

共聚焦掃描顯微鏡 ； 螢光相關光譜

並列摘要

無資料

並列關鍵字

Confocal Microscopy ； Fluorescence correlation spectroscopy

參考文獻

43.林宥穠，2005，Fuconojirimycin C1取代衍生物對嗜熱菌岩藻糖水解酶之抑制研究，國立台灣大學，碩士論文。

10.李旭洋，2006，單顆螢光奈米鑽石：基本光物理性質及生物應用，國立台灣大學，碩士論文。

11.陳怡如，2006，利用共聚焦顯微鏡研究Oxazine1單分子在二氧化鈦(TiO2)奈米薄膜的動力學現象，國立台灣大學，碩士論文。

9.范秀芳，2006，利用各式光譜技術研究液相分子於固相表面之吸附與反應，國立台灣大學，博士論文。

2.Elson, E. L,; Madge, D. Biopolymers 1974, 13, 1.