I 本研究以9-乙基腺嘌呤(9-ethyladenine)與tri-O-acetyladenosine 為分 子模版,用於製備整體式分子烙印聚合物管柱。其製備方法為將分子模 版、單體、交聯劑與progen 的混合溶液導入預先以γ-MPS 矽烷化之內 徑75 µm 毛細管,在聚合起始劑催化下聚合,接著利用針筒通入甲醇與 醋酸之混合溶液萃取分子模版。將所製備的管柱分別應用於核苷酸鹼 基、核苷以及核苷酸混合物的分離。對於核苷酸鹼基,在不同pH 值(4~9) 磷酸緩衝溶液,其滯留順序為cytosine > thymine > guanine > adenine,結 果顯示孔洞對adenine 有較強的滯留力,guanine 次之,thymine 與cytosine 較無明顯的滯留。核苷酸鹼基混合物最佳化分離條件為分離電壓15 kV,磷酸緩衝溶液(10 mM, pH 4),相同管柱連續注入4 次其滯留時間的 RSD 值< 4% ,平均理論板數為3165 m-1。繼而應用於核苷混合物的分 離,在pH 值(7~8)時,核苷所帶的有效電荷接近,故adenosine 滯留較 顯著。核苷混合物最佳化分離條件為分離電壓15 kV,磷酸緩衝溶液(10 mM, pH 8),相同管柱連續注入4 次其滯留時間RSD 值< 2.5%,平均理 論板數12169 m-1。對於核苷酸混合物,在磷酸緩衝溶液pH 值(3~5)時, 其滯留順序與有效電荷順序ㄧ致,得知AMP 並無特殊滯留,故本研究 進而以tri-O-acetyladenosine 為分子模版,在10 mM、pH 8 之磷酸緩衝 溶液AMP 有明顯滯留,但同為嘌呤類鹼基之GMP 其滯留力較弱,其最 II 佳分離條件pH 8、10 mM 之磷酸緩衝溶液,分離電壓為-25 kV,相同管 柱連續注入4 次其滯留時間RSD 值< 3.5 %,平均理論板數5039 m-1。 利用上述所建立系統為探討其複雜基質樣品的可行性,本研究選用主要 成份為多醣體並含少量核苷酸鹼基及核苷的市售靈芝膠囊作分析,以 9-ethyladenine 為分子模版所製備管柱,在硼酸緩衝溶液(10 mM, pH 9) 電壓15 kV 的環境下,成功的分離靈芝內的uracil、uridine 與adenosine, 其滯留順序為uracil > uridine > adenosine。