Doxorubicin誘導rAAV2病毒進行p53腫瘤抑制基因傳遞與表現應用於化療結合基因治療在肝癌治療之研究

Application of Doxorubicin-induced rAAV2-p53 Gene Delivery in Combined Chemotherapy and Gene Therapy for Hepatocellular Carcinoma

陳俊安(Chun-Ann Chen)

指導教授 ： 湯學成

國立清華大學/工學院/化學工程學系/碩士(2008年)

https://doi.org/10.6843/NTHU.2008.00201

摘要

傳遞抑制腫瘤基因p53有潛力發展成治療肝癌腫瘤的方法之一。第二型重組類腺病毒 ( rAAV2 ) 已應用於臨床試驗，相對於其他常用的病毒載體如腺病毒和反轉錄病毒，rAAV2有較高的安全性。然而治療肝癌腫瘤，提升rAAV2對肝癌細胞的轉導效率是必要的。本研究中，我們利用化療藥物Doxorubicin誘導rAAV2轉導肝癌細胞。實驗數據指出：將Doxorubicin和帶有報導基因的rAAV2合併使用，分別對肝癌細胞HepG2 ( p53原生型 ) 與Hep3B ( 缺乏p53 ) 進行轉導，其報導基因表現量比單獨rAAV2轉導的效率分別高出350和120倍；由於效率大幅提升，我們應用攜帶p53基因的rAAV2 ( rAAV2-p53 ) 對肝癌細胞Hep3B進行轉導，使肝癌細胞Hep3B恢復p53的表現。實驗中，將Doxorubicin和rAAV2-p53合併使用對肝癌細胞Hep3B進行轉導，肝癌細胞Hep3B的p53表現量比單獨rAAV2-p53轉導效率高出16倍，而且相較於HepG2原生型p53的表現量更高出380 %。將Doxorubicin ( 0.5 μM ) 和rAAV2-p53 ( MOI = 10 ) 合併作用在肝癌細胞Hep3B ( 12小時 ) ，我們發現96小時後肝癌細胞的生存率下降至66 %，此結果與肝癌細胞Hep3B只有Doxorubicin ( 1 μM ) 單獨作用的生存率相同。上述將Doxorubicin的劑量從1 μM 降到0.5 μM的實驗結果顯示出rAAV2-p53的基因轉導具有抗癌的效果；與其合併Doxorubicin作用時更具有抑制肝癌腫瘤生長的效用。結論，在Doxorubicin作用下，rAAV2-p53對肝癌細胞的轉導效率有明顯提升，因此合併Doxorubicin和rAAV2-p53對治療因p53突變所引起的肝癌 ( Hepatocellular carcinoma, HCC ) 具有加乘的療效。

關鍵字

化療 ； 阿黴素 ； 基因治療 ； 肝腫瘤 ； 肝癌 ； p53 ； 第二型重組類腺病毒

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無資料

並列關鍵字

chemotherapy ； doxorubicin ； gene therapy ； hepatocellular carcinoma ； liver cancer ； p53 ； rAAV2

參考文獻

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