由薄葉牛皮消（Cynanchum taiwanianum Yamazaki）所分離之胡瓜嵌紋病毒特性研究

Characterization of Cucumber mosaic virus isolated from Taiwan swallowwort (Cynanchum taiwanianum Yamazaki)

楊淑惠(Shu- Hui Yang)

指導教授 ： 陳滄海

國立屏東科技大學/農學院/植物保護系所/碩士(2009年)

https://doi.org/10.6346/NPUST.2009.00032

摘要

中文摘要

學號：M9515004
論文題目：由薄葉牛皮消（Cynanchum taiwanianum Yamazaki）所分離之胡瓜嵌紋病毒特性研究
總頁數：76頁
學校名稱：國立屏東科技大學 系別：植物保護系
畢業時間及摘要別：九十七學年度第一學期碩士學位論文摘要
研究生：楊淑惠 指導教授：陳滄海 博士

論文摘要內容：
薄葉牛皮消（Cynanchum taiwanianum Yamazaki） 為蘿藦科台灣原生種植物，其地下塊莖可作為中藥材，目前僅於高雄縣內門鄉有經濟栽培。2005年於台灣高雄縣內門鄉田間發現牛皮消植株葉片呈現疑似病毒性病害，受感染的植株葉片呈現嵌紋病徵，經電顯觀察結果發現，有球型病毒存在。內門鄉栽培區田間罹病率為88％，而網室栽培病徵變化調查，發現病徵表現與溫度有相關性，1～4月溫度較低病徵明顯，5～8月溫度較高病徵較不明顯。具嵌紋病徵之葉片汁液，經紅藜機械接種可成功分離出直徑約28 nm之球型病毒粒子，命名為SW-1分離株；其熱不活化溫度為65℃，耐稀釋度為10-5，24℃及-80℃下，活性分別可維持96小時及12個月以上。每50克接種SW-1分離株的萬國士菸草病葉，經蔗糖梯度離心純化後，約可純化66.66 mg之病毒。寄主範圍測試12科74種植物，其中葫蘆科、藜科、茄科等7科32種植物會被感染並表現病徵。以凝膠電泳分析估算病毒鞘蛋白分子量為26 kDa。將純化病毒免疫注射於紐西蘭兔後，可製備出對應本病毒之力價 2048之專一性抗體；此抗體於西方轉漬反應(Western blotting)、瓊脂免疫雙向擴散反應(SDS-agar gel double diffusion test) 、間接式酵素連結免疫吸附法(indirect ELISA)中，除可與同源抗原反應外，亦會與胡瓜嵌紋病毒(Cucumber mosaic virus)發生專一性反應。以反轉錄聚合酶連鎖反應(RT-PCR)選殖本病毒之鞘蛋白核酸，鞘蛋白基因定序共得全長889個核苷酸（nucleotide, nt），其所對應轉譯含218個胺基酸；將鞘蛋白核苷酸與胺基酸序列，與已登錄於NCBI GenBank之胡瓜嵌纹病毒分離株比對，發現其與由番茄分離之胡瓜嵌紋病毒核苷酸序列有高達99％的相同度(D28780.1、AJ829779 )，胺基酸序列則與CMV(Y10886、AF523340)有100％之相似度。綜合以上結果，顯示本研究由薄葉牛皮消嵌紋病株分離之球型病毒應為胡瓜嵌纹病毒，此為薄葉牛皮消病毒病害之首次報導。

關鍵字：牛皮消病毒病、胡瓜嵌紋病毒、病毒鑑定

關鍵字

牛皮消病毒病 ； 胡瓜嵌紋病毒 ； 病毒鑑定

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並列關鍵字

Taiwan swallowwort viral disease, ； Cucumber mosaic virus, ； virus identification

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