透過您的圖書館登入
IP:54.86.180.90
  • 學位論文

利用帶有FLP/Frt系統的重組桿狀病毒轉導脂肪幹細胞並且運用在骨缺陷修復

Baculovirus-Engineered FLP/Frt System in Adipose Derived Stem Cells and Its Applications in Segmental Bone Defect Healing

指導教授 : 胡育誠
若您是本文的作者,可授權文章由華藝線上圖書館中協助推廣。

摘要


摘要 大範圍骨缺陷通常不易痊癒且治療方式複雜,牽涉到許多困難的外科手術。近來,結合病毒基因載體與間葉幹細胞療法發展出之新穎技術,已顯示可協助並加速骨修復。其中脂肪幹細胞(ADSCs)由於容易分離培養,近來亦受到廣泛研究應用。本研究目的探討藉由FLP/Frt基因延長表現系統之新型重組桿狀病毒轉導ADSCs後是否可以加速修復大範圍骨缺陷。首先利用帶有FLP/Frt系統的基因重組桿狀病毒Bac-FCBW(表現第二型骨型態蛋白(BMP2))及Bac-FCVW(表現血管內皮細胞生長因子(VEGF))轉導ADSCs,觀察表現BMP2或VEGF能力。結果顯示,帶有FLP/Frt表現系統的新型桿狀病毒,可延長基因表現達到28天以上,並可有效促使ADSCs往硬骨細胞分化。我們將轉導過不同重組桿狀病毒的ADSCs混合種入PLGA載體並移植入紐西蘭白兔股骨缺陷(critical-sized femora bone defect)以評估加速骨缺陷修復的效果。X-ray結果顯示,實驗組(植入帶有FLP/Frt系統之ADSCs)不僅可於植入2週時間後,形成新骨連結骨缺陷;並且在植入4週時間後,所有動物皆完成骨缺陷修復(N>6)。另外藉由正子斷層(PET),電腦斷層(CT)掃描,H&E染色與機械應力測試,亦發現與對照組(植入假性轉導或CMV啟動子表現之BMP2, VEGF)比較,混合移植經Bac-FCBW與Bac-FCVW轉導之ADSCs確實可加速大範圍骨缺陷修復。這些實驗結果顯示,結合FLP/Frt延長表現系統之新型桿狀病毒基因治療與ADSCs,可作為大範圍骨缺陷重建的另一選擇。

關鍵字

脂肪幹細胞 骨缺陷 桿狀病毒 BMP2 VEGF

並列摘要


無資料

並列關鍵字

ADSCs massive bone defects baculovirus

參考文獻


1. Kofron, M.D. and C.T. Laurencin, Bone tissue engineering by gene delivery. Adv. Drug Delivery Rev. , 2006. 58: p. 555-576.
2. Phillips, J.E., C.A. Gersbach, and A.J. Garcia, Virus-based gene therapy strategies for bone regeneration. Biomaterials, 2007. 28(2): p. 211-229.
3. Qin, Y., et al., Chromosomal instability of murine adipose tissue-derived mesenchymal stem cells in long-term culture and development of cloned embryos. Cloning Stem Cells, 2009. 11(3): p. 445-52.
4. Hofmann, C., et al., Efficient gene transfer into human hepatocytes by baculovirus vectors. Proc Natl Acad Sci U S A, 1995. 92(22): p. 10099-103.
5. Kost, T.A. and J.P. Condreay, Recombinant baculoviruses as mammalian cell gene-delivery vectors. Trends Biotechnol, 2002. 20(4): p. 173-80.

延伸閱讀