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具不同蔗糖合成酶 RSuS3 表現量之轉殖水稻建立及性狀分析

蔗糖合成酶催化蔗糖與 UDP形成果糖與 UDP-glucose 的可逆反應。在水稻中，此酵素是由至少六種 RSus 基因所表現，其中 RSus3 主要表現於發育中的種子。本論文的目的在建構具有不同 RSus3表現量的轉殖水稻，以探討 RSus3 的生理功能。 將預期可造成水稻各組織中恆常性表現 RSus3、於穀實中過量表現 RSus3 及於穀實中抑制 RSus3 表現的三種質體 pActinSuS3、pGluB1SuS3 及 pSuS3RNAi，經由農桿菌法轉殖到水稻。pActinSuS3 及 pGluB1SuS3 的 T0 及 T1 轉殖株，以 Southern 分析後發現，這些轉殖株帶有一個或二個外來的 RSus3 基因，且能夠在葉子偵測到其表現。分析 T1 植株充實期種子發現，轉殖株 RSus3 的表現比未轉殖之台農 67 號水稻早，轉殖株 RSus3 mRNA 的量也比未轉殖之台農 67 號水稻多。此外，轉殖株 T2 種子的千粒重及平均內外穎長有大於未轉殖之台農 67 號水稻的趨勢。

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表面聲波生物感測器之開發及其應用研究

為了避免液相中聲波能量損失，造成表面聲波感測器無法檢測液相中反應的缺點，本論文以串聯電極式表面聲波生物感測器為測量裝置，將電極上發生之生化反應經由振頻移差進行檢測。由實驗結果可知，串聯不同電容、不同電阻的組合以及環境溫度變化均會造成振頻的改變。當串聯上470 pF的電容時，感測器的振頻即可達到314.5 MHz。而在液相環境中，當液體中離子濃度、介電常數、以及黏度產生變化時，振頻將隨之產生移差。實際量測中，酒精濃度增加1％，振頻會上升550 Hz；而1％的甘油濃度變化會使振頻上升127 Hz。 利用振頻隨離子濃度變化的特性，此系統可發展為酵素反應式生物感測器。例如將尿素酶固定於感測電極上，在最適固定條件下可檢測尿素之最低濃度為10 μM，檢測線性範圍為10~100 μM，檢測時間約為5分鐘。

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種植抗輪點病毒基因轉殖木瓜對土壤微生物多樣性之影響

隨機採集種植基因轉殖木瓜、非基因轉殖木瓜和鄰近無種植木瓜周圍之表土 (0-15 cm) 及底土 (15-30 cm) 土壤進行分析。結果發現此六種土壤水分含量、pH值、總有機碳及總氮含量，各組間無明顯差異。另外，總菌數、真菌數及放線菌數以基因轉殖木瓜周圍之表土含量最高，鄰近無種植木瓜底土含量最低，且表土之菌數均高於底土。使用三種傳統方法及UltraClean Soil DNA Kit 抽取土壤 DNA，以在 -20℃ 使用異丙醇沉澱 DNA 的方法抽取之 DNA 含量最多，而 kit 抽取的 DNA 純度最高。傳統法抽取之DNA 需進一步純化去除腐植酸，才能進行後續的 PCR 反應。由放大片段長度多型性分析、核醣體 DNA 擴增限制酶分析、端點限制片段長度多型性分析及變性梯度膠體電泳四種分析結果顯示，基因轉殖木瓜及非基因轉殖木瓜周圍之表土菌相較為相近，底土菌相亦有相同的趨勢，相似度均在 80% 以上。由此可知，種植基因轉殖木瓜對土壤微生物的影響不大。