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  • 學位論文

甘藷塊根蔗糖磷酯合成酶基因在嗜甲醇酵母菌中表現

Expression and Characterization of Sweet Potato (Ipomoea batatas (L.) Lam) Sucrose Phosphate Synthase in Yeast(Pichia pastoris)

指導教授 : 李平篤

摘要


中文摘要 蔗糖磷酯合成酶 (sucrose phosphate synthase) 是蔗糖生合成中一個極為重要的調控酵素,本論文以甘藷塊根蔗糖磷酯合成酶之 cDNA 作為材料,於酵母菌 (Pichia pastoris) 中進行重組表現。所得表現之蔗糖磷酯合成酶,單體分子量為 50 kD,此結果和實際甘藷塊根中,蔗糖磷酯合成酶單體之分子量 (120 kD),相差一倍,反而與甘藷葉片純化出之蔗糖磷酯合成酶者相近。 而在生化性質分析中,對於異位調控因子影響方面,表現之重組蔗糖磷酯合成酶性質,與甘藷塊根蔗糖磷酯合成酶並不相同,而卻與甘藷葉片之蔗糖磷酯合成酶相似:葡萄糖 6-磷酯 (G 6-P)能活化此蔗糖磷酯合成酶,而無機磷酸鹽 (Pi)則抑制之。最適反應 pH 值實驗中,發現本論文表現之重組蔗糖磷酯合成酶最適 pH 值為 7,其與其他組織內以及真核原核系統表現之蔗糖磷酯合成酶相同,都屬於中性的酵素,並且在酸性與鹼性環境中,呈現不穩定之現象。至於金屬離子對本論文表現之重組蔗糖磷酯合成酶之影響,Ca2+、Co2+ 及 K+ 離子能活化它,而 Na+ 離子則會抑制其活性。此結果類似於甘藷葉片中的蔗糖磷酯合成酶,而非甘藷塊根中之蔗糖磷酯合成酶。因此推論甘藷蔗糖磷酯合成酶,在甘藷中可能沒有其他同功異構酶,而其在各器官或組織中,會產生結構與調控方式之差異,極可能是轉譯後修飾作用後所造成之結果。

並列摘要


無資料

參考文獻


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被引用紀錄


張瓊尹(2007)。甘藷澱粉磷解酶重組蛋白之表現與活性分析〔碩士論文,國立臺灣大學〕。華藝線上圖書館。https://doi.org/10.6342%2fNTU.2007.01943

延伸閱讀