高雄醫學大學天然藥物研究所碩士班學位論文
高雄醫學大學,正常發行
選擇卷期
- 學位論文
中文摘要 對台灣產芸香科花椒屬植物蘭嶼花椒(Zanthoxylum integrifoliolum)之根材及藤花椒(Z. scandens)之莖皮進行化學成分及anti-HIV活性研究。迄今自蘭嶼花椒(Z. integrifoliolum)根材分離得到25種化合物包括: 4-isopentenyloxycinnamaldehyde (1), 4-[4-(3-hydroxypropenyl)phenoxy]-2-methylbut-2-en-1-ol (2), N-methylanthranilic acid (3), tetrahydropalmatrubine (4), flindersine (5), N-methylflindersine (6), dictamnine (7), robustine (8), skimmianine (9), g-fagarine (10), 4-methoxy-1-methyl-2-quinolone (11), canthin-6-one (12), rutaecarpine (13), decarine (14), norchelerythrine (15), aesculetin dimethyl ether (16), 6,7,8-trimethoxycoumarin (17), vanillin (18), syringaldehyde (19), coniferaldehyde (20), evofolin-C (21), (+)-sesamin (22), lupeol (23), b-sitosterol (24)及stigmasterol (25)。其中8種已知成分: 3, 4, 5, 6, 18, 19, 20及 21 係屬首次自本植物分離得到。1及2為自天然界首次分離得到之新化合物。自藤花椒(Z. scandens)莖皮迄今分離得到10種化合物包括: 14, 15, 18, oxychelerythrine (26), rhoifoline B (27), tetracosyl ferulate (28), arnottiamide (29), methyl vanillate (30), 2-(4-hydroxyphenyl)ethyl hexacosanoate (31)及zanthodione (32)。其中6種已知成分18, 26, 27, 28, 30及31係屬首次自本植物分離得到。而32為天然界首次分離得到之新化合物。以上化合物之構造解析由光譜數據決定。 目前分離所得到的化合物中，10, 11及14三種化合物具有體外抗HIV活性。
- 學位論文
山刈葉 [Melicope semecarpifolia (Merr.) Hartley] 為常綠的小喬木，分布於台灣和菲律賓的低海拔森林中，山刈葉之根材具有抗血小板凝集之活性，且根材之化學成分尚未有人研究，因而引起分離化學及抗血小板凝集成分之動機。在氯仿可溶部分，分離得到1個新化合物，為benzenoid: melicopone (13)，及29個已知的化合物，包含8個quinolines: dictamnine (2), kokusaginine(7), (R)-(+)-platydesmine(9), edulinine (26), (S)-(-)-7,8-dimethoxyplatydesmine (10), pteleine (28), (+)-7,8-dimethoxymyrtopsine (11) 和(S)-(+)-geibalansine (27) ; 10個coumarins: angelicin (1), jatamansinol (3), (±)-columbianetin (5), oroselol (6), umbelliferone (8), seselin (16), osthenol (22), 7-O-prenylum- belliferone (23), brosiparin (24),及 (+)-7-hydroxy-8-(2’-hydroxy-3’-me- thylbut-3’-enyl) coumarin (30) ; 1個benzo[c]phenanthridine: oxynitidine (4) ; 5個benzenoids: vanillin (12), syringaldehyde (14), 3-(4-hydroxy-3- methoxyphenyl) propionic acid (15), 2,6-dimethoxy-p-benzoquinone (17), 及benzoic acid (25) ; 1個flavonoid: ayanin (21) ; 1個lignans:(+)-4-keto- pinoresinol (29) ，以及3個steroids之混合物:β-sitosterol (18), stigmasterol (19) 及campesterol (20)，這些化合物的結構經光譜分析證實。在天然界中，benzo[c]phenanthridine alkaloid的分布非常侷限， 而本研究首次自Melicope屬分離到oxynitidine，為本類生物鹼在芸香科之分布增加了一員。 化合物 (2)、(7)、(9)、(12)、(17)、(21)、(22) 及 (25) 具有抗血小板凝集活性，在100 μg/ml之濃度下in vitro之抗血小板凝集的活性已被研究而證實，本研究所測試抗血小板凝集活性之六個化合物，僅有(15) 在50μg/ml之濃度下，對於ADP所誘導之抗血小板凝集有抑制作用。
- 學位論文
蘭嶼肉桂(Cinnamomum kotoense)為蘭嶼產的常綠小喬木，屬固有種，近來因作為觀賞盆栽之用而引進台灣島內，而其化學成分與生物活性尚未被研究過，在本科室經過一系列地篩選具抗結核菌活性之台灣植物，發現蘭嶼肉桂莖材部之甲醇抽出物具抗結核菌之活性，因此進行成分分離，共得到41個化合物，包括四個butanolide類：kotolactone A (1)、kotolactone B (2)、isoobtusilactone A (3)、lincomolide B (4)；一個secobutanolide類：secokotomolide (5)；四個flavonoid類：apigenin (6)、kaempferol (7)、quercetin (8)、genkwanin (9)；三個flavan類：(+)-catechin (10)、(-)-catechin (11)、4’-hydroxy-5,7,3’-trimethoxyflavan-3-ol (12)；二個lignan類：(±)-syringaresinol (13)、(-)-sesamin (14)；八個benzenoid類：trans-ferulic acid (15)、trans-coumaric acid (16)、2,6-dimethoxy- 1,4-benzoquinone (17)、syringaldehyde (18)、vanillin (19)、4-hydroxybenzaldehyde (20)、protocatechuic acid (21)、benzoic acid (22)；六個steroid類：b-sitostenone (23)和stigmasta-4,22-dien-3-one (24) 的混合物、b-sitosterol (25) 和 stigmasterol (26)的混合物、b-sitosteryl-3-O-b-D-glucoside (27) 和stigmasteryl-3-O-b-D- glucoside (28)的混合物；一個triterpenoid 類：squalene (29)；一個 diterpenoid 類：trans-phytol (30)；二個 furan 類：2-acetyl-5- methylfuran (31)、2-acetyl-5-dodecylfuran (32)；九個 aliphatic compound 類：methyl palmitate (33) 和 methyl stearate (34)的混合物、palmitic acid (35)、margaric acid (36) 和 stearic acid (37) 的混合物、lauric acid (38)、docosanoic acid (39)、tetracosane (40)、kotodiol (41)。這些化合物均由光譜分析來決定其構造式。 其中，1、2、5及41為天然界首次分離到之新化合物，而32雖已被合成過，但為自天然界首次分離到之化合物。化合物3、25與26之混合物、33與34之混合物顯現有意義之抗結核菌活性。
- 學位論文
中文摘要 由垂枝長葉暗羅 (Polyalthia longifolia Benth & Hook. f. "pendula") 之皮部總共分離得到三十二個化合物，其中二十八個化合物已確定其結構：包括六個clerodane diterpenoids:16-hydroxycleroda-13-en-15,16- olide-3-one (1), 16 (R and S)-3,13Z-kolavadien-15,16-olide-2-one (2), 16-hydroxycleroda-3,13-dien-15,16-olide (3), 16-hydroxycleroda-4(18), 13-dien-15,16-olide (4), 16-oxocleroda-3,13(14)E-dien-15-oic acid methyl ester (5), kolavenolic acid (6);二個abeo-clerodane diterpenoids: solidagonal acid (7), (4→2)-abeo-16 (R and S)-2,13Z-clerodadien- 15,16-olide-3-al (8);一個labdane diterpenoid:labd-13E-en-8-ol-15-oic acid (9);一個sesquiterpene:(-)-methyl dihydrophaseate (10);二個azafluorenes生物鹼:darienine (11), polylongine (12);一個morphinandienone生物鹼:(-)-pallidine (13);二個oxoaporphines生物鹼: liriodenine (14), lysicamine (15);一個proaporphine生物鹼: (+)-stepharine (16);一個tetrahydroprotoberberine生物鹼: (-)-stepholidine (17);一個lignan:eudesmin (18);四個amides:N-trans- sinapoylthramine (19), N-cis-feruloyltyramine (20), N-trans-feruloyltyr- amine (21), N-p-coumaroyltyramine (22);一個benzenoid:trans-methyl ferulate (23) 及五個steroids:??-sitosterol (24) & stigmasterol (25), ??-sitosterol-D-glucoside (26) & stigmasterol-D-glucoside (27), stigmast- 5-en-3-O-??-D-glucoside tetraacetate (28) 等化合物。其中化合物1為新化合物；5-7、10、13、18-20、22、23及28為第一次由暗羅 (Polyalthia) 屬植物所分離得到之化合物；而化合物5-7、10及28則為第一次從番荔枝科植物中分離得到。 上述化合物在細胞毒殺活性研究方面，化合物4對於人類乳癌細胞 (MDA-MB-231)，其IC50分別為3.22 ?慊/mL；化合物2、4與8對於人類肝癌細胞 (Hep G2)，其IC50分別為2.88 ?慊/mL、3.35 ?慊/mL與2.36 ?慊/mL，以及化合物2、3及4對於人類肝癌細胞 (Hep 3B)，其IC50分別為2.96 ?慊/mL、2.83 ?慊/mL及1.97 ?慊/mL。在抗發炎活性試驗方面,化合物3和5對於fMLP/CB引起人類白血球產生的超氧自由基具有抑制效果，其IC50分別為3.05 ± 1.13 ?慊/mL和0.60 ± 0.90?n?慊/mL。
- 學位論文
中文摘要 前胡屬台灣特有種台灣前胡 (繖形科) 是多年生草本植物，主要分佈於本島中高海拔山區，因為與中藥前胡同屬，其根部為傳統民間用藥，具有解熱、鎮咳、鎮痛、袪痰等作用。由於篩選其根部甲醇萃出物發現具有抗血小板凝集活性，故這次研究是採集台灣前胡之根部，進行成分分離，且研究分離化合物之抗血小板凝集活性。 從台灣前胡甲醇萃取液之不可溶部分，獲得到大量D-mannitol (1)，而氯仿可溶部分，則分離得到31個巳知化合物。包括25個coumarin類: bergapten (2)，isoimperatorin (3)，(–)-deltoin (4)，xanthotoxin (5)， praeruptorin E (8)，hyuganin A (9)，(–)-peujaponisin (10)，(–)-isosamidin (11)，(+)-peuformosin (12)，(+)-anomalin (13)，(+)-cis-3’-acetoxy-4-(2-methylbutyroyloxy)-3’,4’-dihydroseselin (14)， cis-3’-hydroxy-4’-isovaleryloxy-3’,4’-dihydroseselin (15)，laserpitin (16)，(–)-cis-3’-hydroxy-4’-(2-methylbutyroyloxy)-3’,4’-dihydroseselin (17)，(+)-marmesin (18)，isoscopoletin (19)，umbelliferone (20)， psoralen (24)， (+)-lomatin (25)，isofraxidin (26)，(–)-cis-khellactone (27)， (+)-3’-hydroxymarmesin (28)，(+)-rutaretin (29)，(+)-oxypeucedanin hydrate (30)，(+)-dorsteniol (31)；1 個monoglyceride 之1-O-hexadecanoyl glycerol (32)，固醇類β-sitosterol (6) 和stigamasterol (7) 之混何物；2個polyacetylene類之 falcarindiol (22)，panaxynol (23) ；1個酚類 p-hydroxyphenethyl ferulate (21)。其結構依光譜數據而決定。 化合物 (2)、(3)、(4)、(5)、(18)、(20)、(24)、(26) 及 (30) 為本科室自其他植物分離到具有抗血小板凝集活性，而 (7)、(22)、(23) 及 (27) 由文獻亦巳知具有此活性。(11)、(12)則對collagen 誘導之抗血小板凝集顯現活性。
- 學位論文
台灣產樟科(Lauraceae)植物武威新木薑子(Neolitsea buisanensis Yamamoto & Kamikoti f. buisanensis)的葉部甲醇抽出物顯示對A549 (ED50 = 12.2 mg/ml)、P-388 (ED50 = 2.0 mg/ml)癌細胞株具細胞毒性。為了探討本植物化學成分及細胞毒活性成分而進行分離。 由其氯仿可溶部再分配後的90%甲醇可溶部共得到十四個化合物，包括二個eudesmane型倍半?A類: neobuisanolide A (2) 、neolitacumone B (12)；一個guaiane型倍半?A類: neobuisanolide B (4)；四個heliangolid型倍半?A類: glechomanolid (3)、neobuisanolide C (5)、litseacassifolide (7)、neobuisanolide D (8)；五個aromadendrane型倍半?A類:spathulenol (1)、 (-)-ent-4b-hydroxy-10b-methoxy- aromadendrane (9)、(6b,7b)-4b-hydroxy-10a-methoxyaromadendrane (10)、(6a,7a)-4b-hydroxy-10a-methoxyaromadendrane (11)、neobuisanolide E (13)；一個aporphine型生物鹼：N-formylanonaine (6)；一個ionone類：1-(3-hydroxy-but-1-enyl)-2,2,6-trimethyl- cyclohexane-1,4-diol (14)，其中neobuisanolide A (2)、B (4)、C (5)、D (8)、E (13)為首次由天然物分離得到之新化合物。(-)-ent-4b- hydroxy-10b-methoxyaromadendrane (9)為第一次發現，雖然其(+)-form已被發表過。由其正丁醇可溶部共得到neolitcarboline A (15)、kaempferol-3-O-rhamonside (16)、engelitin (17)、taxifolin-3-O-rhamnoside (18)與isoastilbin (19)五個化合物，其中neolitcarboline A (15)為由天然物分離到之新化合物。這些化合物之構造係利用光譜資料來決定。 經由細胞毒體外活性試驗，化合物3、12、15對P-388癌細胞株具有毒殺作用，化合物2、6、8對P-388癌細胞株有marginal毒殺活性；化合物3、6、12、15 對HT-29癌細胞株有marginal毒殺活性。
- 學位論文
苯基苯乙烯酮(chalcone)是一種存在含有黃酮類(flavonoids)植物中的成分，其衍生物可廣泛地在許多藥用植物中發現，諸如明日葉(Angelica keiskei Koidz.)、灰毛豆(Tephrosia purpurea Pers. )、甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisher et D.C.) 等等。近年許多研究證實chalcone具有抗發炎、抗癌、抗氧化、抗腫瘤轉移、以及抗瘧疾作用。 基於以上理由，於是本實驗選定chalcone進行體外人類癌細胞増生抑制效果測試，發現chalcone能夠有效抑制肺癌(A549)、骨癌(U-2OS) 、皮膚癌(BCC-1/KMC)、以及子宮頸癌(HeLa)等癌細胞生長，其中對於人類子宮頸癌HeLa細胞效果最好，故以HeLa 細胞進行細胞抑制作用之深入研究。 結果顯示，chalcone可明顯減少人類子宮頸癌HeLa細胞的存活率且IC50為48 μM。從DNA斷裂試驗(DNA fragmentation assay)和流式細胞儀分析(flow cytometry assay)，發現chalcone能使HeLa細胞的DNA呈現階梯狀分布(DNA ladder)，並且sub-G1有隨時間增加逐漸增加的趨勢，以及胞器有逐漸萎縮的現象，推測chalcone對於HeLa細胞的誘發死亡機制，可能是細胞凋亡(apoptosis)所致，而在細胞週期方面，以流式細胞分析試驗分析，發現chalcone能使人類子宮頸癌HeLa細胞的細胞週期停滯在G2/M期。由以上證據，證實chalcone確實會誘導人類子宮頸癌HeLa細胞走向細胞凋亡並使細胞週期停滯在G2/M期。 此外，我們使用了ELISA kit來分析p53以及 p21/WAF蛋白質的表現。結果發現p53並無隨時間增加而增加的趨勢，而p21則是呈現減少的狀態。故推測chalcone所造成的細胞週期停滯，是藉由p53-independent pathway， p21的表現量降低，進而使細胞停滯在G2/M期。 而涉及細胞凋亡的兩條主要路徑，包括death-receptor pathway 和mitochondrial pathway。在此實驗當中，我們利用了Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)來分析Fas/APO-1、Bcl-2、caspase-9和caspase-3的變化情形。結果發現Fas/APO-1蛋白質的表現，直到24小時，並無顯著差異性，而Bcl-2則是在6小時開始呈現下降趨勢，直到24小時。故接續的實驗裡，我們偵測 caspase-9和caspase-3的酵素活性，發現caspase-9在6小時開始具有上升趨勢，而到了24小時並無明顯的上升情形，而caspase-3則是到24小時，才開始有變化。故推測chalcone是藉由降低Bcl-2的含量，進而活化了caspase-9和caspase-3，最後走向細胞凋亡。 綜合以上，實驗結果顯示，chalcone有效抑制人類子宮頸癌HeLa細胞的生長情形，並且可藉由p53-independent pathway，促使p21的表現量減少，進而使細胞停滯在G2/M期。此外，chalcone能有效降低Bcl-2的含量，經由caspase-9和caspase-3的活化，而走向細胞凋亡。
- 學位論文
摘 要 馬利筋 (Asclepias curassavica) 屬於蘿摩科 (Asclepiadaceae) 植物，主要分布地區為熱帶以及亞熱帶。在台灣民間的使用上為混合本植物與其他民間常用之抗癌中草藥一起服用，以為治療癌症之用。但其療效及其毒性的評估尚未確認。 從馬利筋分離到二十八個化合物，包括十一個doubly linked cardenolide glycosides 類化合物: calotropin (1)，16??-acetoxycalotropin (2)，15??-hydroxycalotropin (3)，16??-acetoxycalactin (4)，calactin (5)，15??-hydroxycalactin (6)，asclepin (7)，16??-acetoxyasclepin (8)，16??-hydroxyasclepin (9)，uscharidin (10)，uscharin (11)，另外尚有uzarigenin (12)，afrogenin (13)，??-amyrin (14)，3-O-acetyloleanolic acid (15)，MR41-33-71 (16) ，20,21-dihydroxypregna-4,6-diene-3-one (17) ，??-sitosterol and stigmasterol (18 and 19)，??-sitosteryl-??-D-glucoside (20)， linoleic acid (21)，phytol (22)，2-methoxy-3-hydroxylbenzoic acid (23)，(-)-syringaresinol (24)，MR41-47-3 (25)，MR41-19-7 (26)，MR41-17-22 (27)及 MR41-17-24 (28)。其中化合物16為新化合物，而化合物24、25需再確定其立體結構。在生物活性方面，化合物12、14及22 對不同的細胞株顯現抗癌活性。所分離得到之已知化合物結構皆經與文獻資料比對後，確認其結構。
- 學位論文
刺五加乃是我國固有的草藥。在動物 (in vivo) 實驗方面，經口灌食刺五加水萃取物到正常老鼠後，可產生劑量相關方式(dose-dependent)的降血糖作用。同樣地，靜脈注射syringin（刺五加所含有效成分）到正常老鼠後，也產生類似的作用。而且，血中胰島素濃度也因而隨之增高；表示此降血糖作用可能與胰島素有關。以腹腔注射atropine或scopolamine再靜脈注射syringin，發現它們皆可抑制其降血糖的作用。若先給予physostigmine再同樣投予syringin，則可增強其降血糖的作用；顯示syringin的降血糖作用與副交感神經有關。另外，給予vesamicol或hemichoninium，將神經末端acetylcholine濃度減少，則syringin的降血糖作用也跟著減少；表示這項降血糖作用與神經末端acetylcholine釋放有關。若給予M3受體阻斷劑4-DAMP mustard，發現它會以劑量相關方式(dose-dependent)阻斷syringin的降血糖作用；表示其降血糖作用與M3受體有關。可是，給予aexamethonium或pentolinium再投予，發現syringin的降血糖效果不變，故其降血糖作用與自主神經節的活化無關。由此可知，刺五加的syringin是藉由副交感神經尾端刺激acetylcholine釋放，使之作用在胰臟的M3受體，導致胰島素分泌來產生降血糖作用。另一方面，經口灌食刺五加水萃取物到高血壓老鼠(spontaneous hypertensive rats SHR)後，產生劑量相關方式(dose-dependent)的降血壓作用。可是，靜脈注射syringin到高血壓老鼠(spontaneous hypertensive rats SHR)，却沒有任何的變化。分析刺五加的水抽取層、70%酒精抽取層、95%酒精抽取層等三部份的syringin含量，得知syringin主要含在水抽取層。而且，灌食刺五加的95%酒精抽取層到高血壓老鼠(spontaneous hypertensive rats SHR)會有顯著的降血壓效果，灌食水抽取層的降血壓效果則較差。因此，刺五加的降血壓成份乃是含在酒精抽取層的物質而非syringin。由此可知，刺五加會藉由不同的有效成份來產生血糖下降和改善高血壓的作用。
- 學位論文
中 文 摘 要 金剛纂(大戟科)為常綠小喬木，原產於印度、斯里蘭卡，台灣各地則是零星的栽培。全株含多量白色乳汁，莖葉分泌之大戟膠，可供藥用。 在化學成分研究方面，本研究從金剛纂乙醇粗萃物中分離純化得到29個化合物，經由圖譜數據分析，其中有二十四個三萜類，一個黃酮類以及四個固醇類化合物。三萜類中包含 Friedelane type: 3b-friedelanol (1), 3a-friedelanol (2), 3b-acetoxy friedelane (3), friedelin (4)；glutinane type: glutinone (5), 3b-glutinol (6), 3b-acetoxy-glutinane (7) ；lupane type: lupenone (8) ；taraxerane type: taraxer-14-en-3a-ol (9), 3a-acetoxy taraxer-14-ene (10), 3b-acetoxy taraxer-14-ene (11) ； oleanane type: b-amyrin (12), b-amyrin acetate (13) ；dammarane type: dammarendiol-II monoacetate (14) ； ocotillol-II acetate (15) ；simiarenane type: 3b-simiarenol (16), simiarenone (17) ；cycloartane type: cycloartanol (18), 3b-cycloart-25-ene-24-one (19), cycloart-23-en-3b, 25-diol (20), a mixture of 24-methylene-cycloartanol (21) and 3b-lupenol (22) (lupane type) ；cycloeucalane type: cycloeucalenol (23), 31-norcycloartanol (24) 。黃酮類化合物為kaempferol-3- O-rhamnoside (25) 。四個固醇類化合物為 a mixture of b-sitosterol (26) and stigmasterol (27), and a mixture of b-sitosteryl-3-O-b-D-glucoside (28) and b-stigmasteryl-3-O-b-D-glucoside (29). 在所有已分離純化物中，化合物1, 2, 3以及9具有明顯抗病毒活性，在 5 mg/ml之下其抑制率分別為 132.43, 80.94, 109.01 以及 111.01%