檢測家禽流行性感冒病毒非結構蛋白質抗體的間接型ELISA

Detecting Antibody to Avian Influenza Virus NS Protein by Indirect ELISA

邱怡昌(Yi-Chung Chiu) ； 陳怡彤(Yi-Tung Chen) ； 葉修如(Shiu-Ru Yeh) ； 王金和(Ching-Ho Wang)

《臺灣獸醫學雜誌》 35卷4期 (2009/12) Pp. 316-320

https://doi.org/10.7009/TVJ.200912.0316

摘要

由於施打疫苗的雞隻其血清中不含有NS1抗體，而感染野外株的雞隻會產生NS1抗體，故發展檢測NS1抗體之間接型ELISA(NS-ELISA)以區別雞隻體內的抗體的來源。從A/chicken/Taiwan/2838V/00(H6N1)病毒中抽取RNA，增幅NS1基因，在原核細胞表現NS1蛋白質，利用親和層分析法純化蛋白質，塗鍍於微平板做為抗原，發展檢測抗NS1抗體的ELISA。為防止NS1蛋白質中殘留之蛋白質干擾NS-ELISA的效果，以低齡及高齡雞隻的陰性血清以檢測訂定判定標準。結果顯示NS-ELISA可區分出陽性與陰性血清，且不受殘留之蛋白質干擾，其敏感性及特異性分別為94%及97%。故可用於區別雞隻體內的抗體是由施打疫苗或是感染野外毒產生的。

關鍵字

家禽流行性感冒 ； 酵素聯結免疫吸附法 ； 非結構蛋白質1

並列摘要

Due to no anti-NS1 antibody, an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using recombinant NS1 protein as an antigen (NS-ELISA) was developed to differentiate avian influenza virus (AIV)-infected from vaccinated chickens. The NS1-encoding gene of avian influenza A/chicken/Taiwan/2838V/00 (H6N1) virus was expressed in E. coli. The results showed that the sensitivity and specificity of this NS-ELISA were 94% and 97%, respectively. Therefore, this assay could be useful for serological diagnosis to distinguish poultry infected with influenza viruses from those immunized with inactivated vaccines.

並列關鍵字

avian influenza ； enzyme-linked-immunosorbent assay ； nonstructural protein 1