流蘇幼花衍生胚性細胞懸浮培養及體胚發生誘導

Young Floret-derived Embryogenic Cell Suspension Culture and Induction of Somatic Embryogenesis of Fringe Tree （Chionanthus retusus Lindl）

羅靜琪(Jing-Chi Ruo)

指導教授 ： 許圳塗

國立臺灣大學/生物資源暨農學院/園藝學研究所/碩士(2004年)

https://doi.org/10.6342/NTU.2004.01179

摘要

流蘇（Chionanthus retusus L.）之樹型與花型優美，為具有發展潛力之觀賞花木，同時也為具多種療效之藥用植物。由於種子具有上胚軸休眠之特性，且利用扦插繁殖時難發根，被列為難再生植物。本研究為利用流蘇之花器組織進行培養以及細胞懸浮培養，探討胚性細胞增生及體胚發生條件，期能量化形成體胚，以供微體繁殖之參考。
參試流蘇幼花序上約8-10 mm大小之小花作為培植體，接種於含生長素2,4-D組合細胞分裂素TDZ和BA之WPM培養基中。培養7天後即有少許癒合組織產生，而癒合組織多從花托基部切口處產生。比較生長素與細胞分裂素組合，其中以2,4-D 1.0~2.0 mg/L 組合BA 0.5 ~2.0 mg/L處理對癒合組織的誘導發生率較佳，均可達50﹪以上。癒合組織外觀為黃色或淺綠色，隨著培養時間增加，在表面會增生出淺黃色、團粒狀的癒合組織。
利用幼花衍生之癒合組織進行細胞懸浮培養。以WPM為基礎培養基、添加2,4-D 1.0 mg/L及蔗糖2﹪，或是MS培養基中修正硝銨氮鹽比為2：1、2,4-D 1.0 mg/L、蔗糖3 ﹪之環境。在培養八週後即有胞質緊密之細胞散出，待得到均質細胞系時，更換至以MS為基礎培養基、添加2,4-D 1.0 mg/L及蔗糖3﹪之增生培養基中，可得較高之細胞增生量。取30 ~ 60 mesh間之細胞團，平板培養於含NAA 0.2 mg/L、2ip 0.2 mg/L 、 kinetin 0.1 mg/L 及zeatin 0.05 mg/L之SH3培養基中，四週後可觀察到體胚形成。取大小約0.4 cm之子葉期體胚接種於含GA之發芽培養基中，四週後體胚之胚根及胚芽皆能順利萌發。
以流蘇未成熟有性胚所衍生之均質懸浮細胞系為供試材料，培養於MS培養基修正硝銨氮鹽比為2：1之環境下，細胞在繼代培養後第6天呈現快速增生之現象，第12天之後生長速度減緩。以此推測，以14天為一繼代間隔較為恰當，符合長期培養之增殖效率。而預處理之目的，在於能預極化生長，提升體胚形成品質。

關鍵字

植株再生 ； 流蘇 ； 體胚發生 ； 細胞懸浮培養

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無資料

並列關鍵字

plant regeneration ； Cell Suspension Culture ； Somatic Embryogenesis ； Chionanthus retusus Lindl ； Fringe tree

參考文獻

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