鮑氏不動桿菌利用芳香族化合物之研究

The utilization of aromatic compounds by Acinetobacter baumannii

鄭喬瀞(Chiao-Ching Cheng)

指導教授 ： 許鴻猷

長榮大學/健康科學學院/生物科技學系(所)/碩士(2015年)

https://doi.org/10.6833/CJCU.2015.00155

摘要

鮑氏不動桿菌是一株好氧的革蘭氏陰性菌，在空氣、水和土壤中都可以被發現，它也是人類的致病性細菌。由於其生長的環境中可接觸不同種類的芳香族芳香族化合物，另外先前的研究發現鮑氏不動桿菌，可以利用芳香族化合物當作能量的來源。本實驗室先前之研究發現鮑氏不動桿菌有分解利用植物荷爾蒙吲哚乙酸(Indole-3-acetic acid; IAA) 之能力，本研究的目的有(1)探討鮑氏不動桿菌參與代謝IAA的基因(2)探討鮑氏不動桿菌是否可以利用人工生長素吲哚丁酸(Indole-3-butyric acid; IBA)、1-萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid; NAA)以及2, 4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid; 2,4-D)。我們將野生株鮑氏不動桿菌培養在M9培養基中，測試它是否可利用IAA、IBA、NAA以及2,4-D，結果證實野生株鮑氏不動桿菌可利用這四種芳香族化合物。為了研究鮑氏不動桿菌在利用IAA、IBA、NAA以及2,4-D之參與基因，首先以跳躍子進行鮑氏不動桿菌的突變，總共獲得1400株鮑氏不動桿菌跳躍子插入之突變株，由這些突變株共篩選到90株無法培養在分別含有IAA、IBA、NAA與2, 4-D的M9培養基中生長。接著進行任意引子聚合酶連鎖反應(arbitrary primer polymerase chain reaction; AP-PCR)，已定位其中7株突變株中跳躍子所插入的基因，AP-PCR結果發現有四個不同的基因參與利用IBA、NAA以及2, 4-D，這四個基因分別為thiC (Thiamine biosynthesis protein)、purF (Amidophosphoribosyltransferase)、hisD (Histidinol dehydrogenase)以及ilvE (Branched-chain amino-acid aminotransferase)。另外還利用南方墨點法確認只有一跳躍子只插入鮑氏不動桿菌的染色體中，更加確定這四個基因真正參與這些芳香族芳香族化合物的利用。在鮑氏不動桿菌利用IAA的實驗中，我們藉由轉錄體分析得知，當鮑氏不動桿菌利用IAA時，特定基因有明顯表現的情形，並探討相關基因參與代謝。藉由本研究更加了解鮑氏不動桿菌在利用芳香族化合物時參與利用反應之基因與其表現，並可將本研究之結果應用於植物荷爾蒙之調控與清除環境中的2,4-D汙染以達到土壤復育之目的。

關鍵字

吲哚乙酸 ； 吲哚丁酸 ； 1-萘乙酸 ； 2, 4-二氯苯氧乙酸 ； 鮑氏不動桿菌

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無資料

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Acinetobacter baumannii ； IAA ； IBA ； NAA ； 2,4-D

參考文獻

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