α-2,3-唾液酸轉移酶之 C-端修飾與固化

α-2,3-Sialyltransferase C-terminal Modification & Immobilization

郭昱瑩(Yu-Ying Kuo)

指導教授 ： 林俊成

國立清華大學/理學院/化學系/碩士(2008年)

https://doi.org/10.6843/NTHU.2008.00353

摘要

本論文探討 α-2,3-唾液酸轉移酶的 C-端修飾，並以 C-端位向專一性方式固化在磁性奈米粒子表面。首先，結合 intein 蛋白質表達系統，及 native chemical ligation（NCL）反應機制，可有效對 α-2,3-唾液酸轉移酶 C-端進行修飾，並以生物晶片及西方墨點法證實 NCL 反應的發生。接著改善磁性奈米粒子的製程，製備不同的功能化磁性奈米粒子，並降低 α-2,3-唾液酸轉移酶非專一性吸附的發生。在酵素與固化載體準備齊全後，以各種不同的生物結合方式，將 α-2,3-唾液酸轉移酶固定化於磁性奈米粒子表面，並比較固化後酵素的活性保留率。嘗試使用的固化方法有隨機固化、click chemistry、NCL 及 biotin - streptavidin 吸附作用，雖然最終最佳的酵素活性保留率只有原來的 34%，但卻是隨機固化的 6.8 倍。此外，本論文研究更加深我們對 α-2,3-唾液酸轉移酶的認識，以及酵素固定化可能面臨的問題及可供解決的方法。

關鍵字

α-2,3-唾液酸轉移酶之 C-端修飾與固化

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參考文獻

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