利用石英晶體微天平建立蕙蘭嵌紋病毒和齒舌蘭輪斑病毒快速檢測系統

Rapid Detection of Cymbidium mosaic virus and Odontoglossum ringspot virus by Quartz Crystal Microbalance

施雯齡(Wun-Ling Shi)

指導教授 ： 戴守谷

國立虎尾科技大學/文理學院/生物科技研究所/碩士(2012年)

摘要

石英晶體微天平(Quartz crystal microbalance , QCM)原理是基於物質吸附於在石英晶體的表面會改變其振盪頻率，通過頻率變化，即可檢測物質是否存在。本研究利用石英晶體微天平建立蕙蘭嵌紋病毒 (Cymbidium mosaic virus, CymMV)和齒舌蘭輪斑病毒 (Odontoglossum ringspot virus, ORSV)快速檢測系統。本研究在石英晶片金屬電極表面固定化一層專一性的蘭花病毒抗體(CymMV and ORSV)。接著將感染蘭花病毒(CymMV and ORSV)的蝴蝶蘭葉片萃取液利用此抗體晶片進行病毒檢測。並探討蘭花病毒抗體晶片再生次數與固定化後檢測之穩定性。 在專一性之結果是蘭花病毒抗體晶片對其目標病毒之蝴蝶蘭樣品有顯著頻率衰減情形；然而對健康的和非目標病毒之蝴蝶蘭樣品則無顯著的頻率衰減情形。在靈敏性之結果是CymMV和ORSV抗體晶片對其目標病毒之蝴蝶蘭葉片萃取液檢測極限為稀釋103倍。我們 對抗體晶片進行再生，結果是CymMV抗體晶片可進行21次檢測工作，而ORSV抗體晶片可進行8次 。在固定化後不同天數檢測其穩定性，CymMV抗體晶片可保存35天，ORSV抗體晶片則是28 天。本研究成功地利用QCM建立CymMV和ORSV快速檢測系統。QCM檢測方法在每一樣品的檢測只需10-15分鐘便能得知結果，並與傳統ELISA檢測方法進行比較，具有快速且便利之優勢。此快速檢測系統之建立，將可應用於許多植物病毒的防疫與檢疫工作上。

關鍵字

蘭嵌紋病石英晶體微天平 ； 快速檢測 ； 蕙毒 ； 齒舌蘭輪斑病毒

並列摘要

Quartz crystal microbalance (QCM) is based on the occurrence that frequency changes of resonance oscillation through the adsorption of substances on the surface of a quartz crystal. In this study, a system of QCM biosensor was established to detect two viruses, cymbidium mosaic virus (CymMV) and odontoglossum ringspot virus (ORSV). Virus-specific antibodies immobilize on the quartz crystal surface of the biosensor as the recognition probe for orchid virus detection. The anti-CymMV and ORSV QCM chips stabilize for storage at least 35 and 28 days, respectively. The regeneration of anti-CymMV and ORSV QCM chips was examined with 21 and 8 times, respectively. This system reveal significant in time saving and easy to use compared with ELISA and RT-PCR. The advantages of this biosensor are highly specificity, sensitive, rapid and simple. This approach could be widely applied to rapid detection for various viruses in inspection and quarantine.

並列關鍵字

Quartz crystal microbalance ； Rapid detection ； Cymbidium mosaic virus ； Odontoglossum ringspot virus

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