青蒿揮發油抗痤瘡病原體及解熱作用的實驗研究

The Experimental Study of Anti-acne Pathogeny and Defervescence of Artemisia Naphtha

賴鎮源(Zhen-Yuan Lai)

《中醫藥研究論叢》 8卷2期 (2005/09) Pp. 123-170

https://doi.org/10.6516/TJTCM.200509_8(2).0008

摘要

青蒿中提取的青蒿素具有很強的殺滅瘧原蟲的作用，是目前治療瘧疾病的首選治療藥物。而青蒿素類產品目前在國際市場上的價格一直居高不下，影響了此類產品的推廣和廣泛使用，究其原因是因為青蒿素在青蒿中含量低，加上青蒿素在提取過程中多種副產品沒有得到充分綜合利用，如青蒿揮發油和青蒿酸等，通常被作為廢棄物進行處理，一方面對土壤和環境造成污染，另一方面在處理過程中增加了青蒿產品的成本。為了降低青蒿素的成本，開展對青蒿的綜合利用研究是很有意義的。根據青蒿性味苦、辛，微寒，氣香。入肝、膽經。具有清熱解毒，退熱功效的特性；同時現代研究已證明，青蒿揮發油具有抗病毒和抑制皮膚真菌的作用，臨床上青蒿後下，有退熱作用。因此，開展青蒿揮發油對常見病一座瘡致病菌的影響，以及青蒿揮發油退熱作用的研究是一項有益的嘗試。
座瘡(acne)是皮膚科的常見病、多發病，尤其在青春期男女發病率最高。它是毛囊皮脂腺的慢性炎症，主要發生於顏面及胸背等處，表現為黑頭粉刺，炎性丘疹，繼發膿皰或結節，囊腫等，個別患者甚至形成凹陷或增生性瘢痕，嚴重影響患者的生活品質。其發病機理一般認為涉及：(1)毛囊皮脂腺導管角化異常；(2)微生物作用，主要與座瘡丙酸桿菌有關；(3)雄激素對皮脂腺的調控；(4)炎症損害。本病屬中醫“肺風粉刺”範疇。中醫認為其發病多因飲食不節，過食肥甘厚味，肺胃濕熱，複感風邪而致。根據該病青春期發病率高，且女性座瘡患者病情多在月經前加重的特點，提出本病乃相火亢盛為本，復因過食辛辣肥甘，釀成濕熱，氣血郁滯於皮膚經脈而發病為標。
為了探討青蒿油治療座瘡病原體的作用機理和評價青蒿油胃腸給藥對乾酵母致熱作用的解熱效果，我們進行了以下實驗研究：
1．青蒿油柔性脂質體製備
膠團溶液的製備方法：稱取大豆卵磷脂2.75g，去氧膽酸鈉0.75g，青蒿揮發油1.8 ml，置梨形瓶中，加入氯仿－甲醇(1:1)溶解；旋轉蒸發後除去溶劑，使磷脂等在瓶壁形成均勻的薄膜，然後在燒瓶中加入153.9mmoml/L氯化鈉水溶液至20ml，振搖後即得柔性脂質體粗混懸液，在冰水浴條件下探針式超聲5-10min，這樣便可以得到納米脂質體膠體溶液[1]，最後在燒瓶中加入153.9mmoml/L氯化鈉水溶液至100ml即可。
2．測定青蒿油和青蒿油納米脂質體分別對三種病原菌的抑制作用
採用試管藥基法，將提前轉種培養的菌種（菌齡：即24小時培養物），先用LB肉湯沖洗並製成菌液，菌液濃度為107菌／ml。每只藥基管加菌液1滴約0.3ml，以無菌巴氏管滴入斜面。其中座瘡丙酸桿菌接種後，以無菌棉球塞入試管中部，再加焦性沒食子酸約10mg，以另一棉球覆蓋，再滴入943.4mmol/LNa2CO3，約0.4ml使之形成厭氧環境，加不透氣橡皮塞，倒置於試管架上。座瘡丙酸桿菌和金黃色葡萄球菌置37℃恒溫培養箱，糠秕孢子菌置26℃恒溫培養箱，每天觀察一次，連續2周。結果判定：培養至第6天，以不加菌的空白對照管為標準，最低一管無菌生長的藥基管濃度，即為對該種菌的最低抑菌濃度，抑菌實驗重複3次，最終結果取其重現值或中間值。
結果表明：青蒿油對導致座瘡的三種主要病原菌均有不同程度的抑制作用；且以青蒿油納米脂質體的抑制作用較強，尤其是對金黃色葡萄球菌和糠秕孢子菌的抑制作用較為顯著。所以認為該類製劑作為外用搽劑治療座瘡等皮膚疾病，值得進一步研究。
3.青蒿油納米脂質體搽劑臨床療效觀察
全部患者均採取門診觀察治療，每療程一個月，一般觀察1~3個療程，觀察指標為治療前治療後座瘡數目和皮損變化及兼症的改善情況。
36例痤瘡患者被納入觀察，結果：基本痊癒（原皮損全部消退）8人，占22.2%；顯效（原皮損消退75%以上）20人，占55.6%；有效（原皮損消退50%以上）6人，占16.7%；無效（原皮損無明顯改變）2人，占5.6%。未見不良反應，但停藥後有復發現象。同時也證明療程與療效呈顯著相關性，輕者僅需使用一個療程，較重者需使用二個療程以上才能起效。
4.青蒿油灌胃給藥對乾酵母致熱作用的解熱效果
取大白鼠24只，隨機分為4組，每組6只，並稱重標記。實驗前3天用歐姆龍電子顯示體溫表測肛溫二次，測得肛溫均在38.3℃以下（大鼠的正常肛溫範圍為：36.6-38.3℃）。實驗當天先測基礎肛溫均在38.3℃以下，然後於大鼠背部皮下注射20%乾酵母懸液10ml/kg，待6小時後肛溫上升到高峰時（肛溫普遍升高1.2-2.2℃）開始給藥：(1)對照組：以等量雙蒸水灌胃；(2)阿司匹林組：阿司匹林0.4mg/kg灌胃；(3)青蒿油高劑量組：10%青蒿油2ml灌胃；(4)青蒿油低劑量組：10%青蒿素揮發油1ml灌胃。給藥後每隔一個小時測肛溫一次。本結果以不同時間段所測得肛溫值與基礎肛溫值之差表示，並作為肛溫變化的指標。
結果顯示：20%乾酵母背部皮下注射6小時後有明顯的致熱作用，肛溫平均升高1.9℃，提示該模型製作成功。陽性藥物阿司匹林0.4mg/kg以及青蒿揮發油高劑量組灌胃後肛溫明顯下降。
結論
1.青蒿油納米脂質體對痤瘡三種主要病原菌均有不同程度的抑制作用。
2．青蒿油納米脂質體臨床試用，對不同程度的痤瘡患者有治療作用，提示該製劑值得進一步研究。
3．青蒿揮發油高劑量灌胃給藥對20%乾酵母致熱有明顯降溫作用，提示青蒿揮發油有一定的解熱作用。

關鍵字

青蒿揮發油 ； 痤瘡病原體 ； 解熱作用

並列摘要

Artemisinin extracted from Artemisia has been shown to have strong malarial parasiticidal effect and is currently the front choice medicine when treating malaria. Products derived or resembling Artemisinin on the international market remain expensive which influences the distribution and dissemination of these products. In examining the reason for this, we see that the volume of this product extracted is low. Another important reason is that many byproducts from this extraction product, such as Artemisia naphtha and Artemisia acid, are not completely used and are generally treated as waste. This not only leads to soil and environmental pollution, but also adds to the cost of the production of products derived from Artemisia. In order to reduce the cost price of Artemisininit is of great interest to research the rate of combined use of Artemisia. Artemisia has a bitter, pungent and slightly cold nature with qi fragrance and it enters the liver and gallbladder channels. As such, it possesses clearing heat and detoxifying as well as anti-febrile characteristics. Simultaneously recent research has proven that Artemisia's volatile oils posses anti-viral and dermal fungal inhibiting properties. Clinically, when Artemisia is added to a brewed formula towards the end of the boiling process, it is able to reduce fever. As a result, there is a need to initiate research on the effect of Artemisia's volatile oils on dermal acne and bacteria as well as its anti-febrile properties.

並列關鍵字

Artemisia naphtha ； Acne pathogeny ； Defervescence