超解析率廣視野螢光顯微系統於細胞核膜形貌研究之應用

黃旭成

超解析

中正大學物理學系學位論文

2014年

碩士

林俊元

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廣視野螢光顯微術在生物影像觀測上為一重要量測工具，本系統另外加入二維結溝光照明後突破繞射極限，大幅提高解析度，也具有良好的切片能力，因此在觀測生物樣品時能夠非侵入式的量測，不破壞樣品本身的結構。 在此次的研究中，以本實驗技術觀察真實生物樣品，藉由超高影像解析度分辨蛋白質之間的相對位置，提供資訊幫助生科所的團隊能夠近一步了解蛋白質對人體的影響。 經過量測，系統橫向解析度為136 nm，縱向解析度約為400 nm。而在拍攝標準生物樣品的時間僅需10秒。經過程式處理得到超高解析度影像只需6秒。而在長時間的拍攝生物樣品時，系統的定位準確度可達1pixel。 而在厚樣品的處理上，使用立體疊圖的方式來觀測細胞核膜邊界的形貌，藉以提高辨識度。

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